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(無題) 削除/引用 No.9737-3 - 2021/06/09 (水) 19:34:21 - あの 念のため、スライドグラス、カバーグラス、封入材の屈折率を 確認するちよいです。 対物レンズの許容屈折率とあっているかが、ポイントです。 押すのは、あつさを減らして、屈折の影響を減らしますが。 それから、念のため、対物レンズの先端にダイアルがついてないか、 適切に設定してるかなどもー確認した方が良いです。

(無題) 削除/引用 No.9737-2 - 2021/06/09 (水) 12:59:11 - wwn まず、同じ研究室の人などでよく撮られている方に聞く方が解決すると思います。(みせてもらえるし、見てもらえる) ピントを調節してもぼやけるのは蛍光画像でしょうかそれとも透過画像でしょうか。 押し付けるとあるので、何か組織を押しつぶしているということでしょうか。 押し付けが足りないと感じるほど、観察対象に厚みがあるのであれば、共焦点顕微鏡などでない場合どうしてもぼやけるものが出てきそうな気もします。 そういうことでないのであれば、まずは顕微鏡に関して何かチェックは行いましたでしょうか。 レンズの汚れや光路途中のゴミ、照明の調整不備など。 観察対象の厚みの問題であれば、場合によっては透明化すると改善できるかもしれません。 少し、情報が少ないのでもう少し詳しくあると他にも回答が出てくるかもしれません。

免疫染色 封入方法 削除/引用 No.9737-1 - 2021/06/08 (火) 14:21:14 - ぽよよ 免疫染色を普段から行っているのですが、蛍光顕微鏡で観察するときに困っていることがあります。 うまく封入されていないのか、ピントを少し変えれば蛍光が見える細胞があったり、ピントを調節してもずっとぼやけている細胞があったりします。タンパク質の局在をサンプルごとに調べているため、このままでは集めたデータにズレが出てくるので困っています。 封入の際には、スライドグラスに室温に戻した封入剤を垂らし、カバーガラスを乗せ、ひっくり返して上から押しつける作業を行っています。 押し付けが足りないから細胞によってピントがずれるのかなと思っています。 何か良い方法がございましたらご教授いただけると幸いです。よろしくお願い致します

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