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(無題) 削除/引用 No.9873-5 - 2021/08/24 (火) 02:26:07 - おお 計算のどの部分で悩んでいらっしゃるのでしょうか。そこが解決しないと、他のバッファーを作るときに同じ質問をする羽目になるような。 考え方の一つは、 １M Trisは １Lに １２１gのTrisがはいってます。 100 mM Trisを１L調製しろといわれると12.1 g Trisを用意しますよね。 まあ昔は小学生でもできる計算とかいって非難したりもしましたが、、、 てか、つりではないと思いたいけど。

(無題) 削除/引用 No.9873-4 - 2021/08/23 (月) 19:15:44 - noname あと、細かいことですけど、 "調整"ではなく"調製"です。

(無題) 削除/引用 No.9873-3 - 2021/08/23 (月) 17:45:18 - G25 Tris 1 M -> 0.1 M　(10倍希釈) 終体積 500 mL x 1/10 = 50 mL 1M Tris 5 M NaCl -> 0.1 M 　(50倍希釈) 終体積 500 mL x 1/50 = 10 mL 5M NaCl 1 M MgCl2 -> 5 mM (200倍希釈) 終体積 500 mL x 1/200 = 2.5 mL 1M MgCl2 それぞれ計りとって、水を加えて体積を500 mLに合わせる。 テクニカルチップ MgCl2は省略してもいい、というか入れないほうがいい。 AP反応バッファーにMgCl2を加えると、保存中に析出しやすい（というか結晶核となって析出を促進する？）。一旦、析出を生じると温めようが撹拌しようが、まあ溶けない。 析出した結晶が顆粒状のバックグラウンドを生じる原因になる。 じつは反応バッファーにMgを加えなくても十分にAPは活性をもつ。 AP自身が金属タンパク質でMgを配位していて、これをキレーターで奪ったりしなければそれで十分で、Mgを加える必要なない。

(無題) 削除/引用 No.9873-2 - 2021/08/23 (月) 17:44:00 - qwe 1M→100mM 10倍希釈 5M→100mM 50倍希釈 1M→5mM 200倍希釈 総量に対して上の割合で秤取しpH9.5に合わせつつ500mLにメスアップ 流石に単位の意味も分からない人が調製した試薬は誰も使いたくないし、後々トラブル起こしそうだからご自分のレベルについて指導者に正直に申告すべき。 高校以下の理科の課題なら自分で勉強すべき。

試薬調整の仕方 削除/引用 No.9873-1 - 2021/08/23 (月) 17:17:47 - pa とても初歩的な質問で申し訳ございません。 試薬調整(western blotの発色に使うAP buffer)の方法で質問です。 100 mM Tris-HCl(pH9.5) 、100 mM NaCl 、5mM MgCl2 計500ml作製したいと思っています。 手元には1M Tris-Hcl(pH9.5)、 5M NaCl 、1M MgCl2があるのですが、これらの各必要量はどのように計算すればいいのでしょうか？ どなたかご教示いただけたら助かります。

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