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(無題) 削除/引用 No.1031-7 - 2012/10/18 (木) 23:12:02 - 八丈島のキョン >[Re:6] ふぉーさんは書きました : > 固定はPFAで行っています。 でしたらBouin'sでの固定を試してみることを強くおすすめします。 くどいようですが見違えるほど核がきれいに染まって感動しますよ。

(無題) 削除/引用 No.1031-6 - 2012/10/18 (木) 18:45:11 - ふぉー >おやじさん レスありがとうございます。 そうなんですよ。 なかなかステージの判定は難しいそうです… >八丈島のキョンさん レスありがとうございます。 固定はPFAで行っています。 Bouin'sでの固定、検討してみます。 > 組織さん レスありがとうございます。 FSA固定は知りませんでした。 もう少し調べてみます。 ステージの判定自体は論文等を参考にしながらでも出来るのですが、染色結果があまりよくないと判定できないんですよね… ヘマト後の色出しは十分行っています。

(無題) 削除/引用 No.1031-5 - 2012/10/18 (木) 13:09:00 - 組織 もしHEで核の染まりが薄いのなら、ヘマトキシリンの時間を長くしたらどうでしょうか？ ちなみにヘマト後の水洗（色出し）は十分行ってますか？

(無題) 削除/引用 No.1031-4 - 2012/10/18 (木) 13:03:27 - 組織 精細管のステージは、対象となる精細管がどの分化段階のgerm cellで構成されているかで決定します。またステージの数は動物種によって違います。 専門家ではないのでうろ覚えですが、精子細胞の頭部がどの位置に存在しているとか、germ cellの層の厚さとかで大まかに（ステージI-IVみたいに）分類していたと思います。 対象がマウス・ラットなら毒性病理学関連の専門家に聞くとか、関連教科書を読めば書いてあるかもしれません。 ちなみに精巣の組織切片を作る場合は、FSA固定（確かformalin sucrose acetate）という特殊な固定法を使うことがあるようです。

(無題) 削除/引用 No.1031-3 - 2012/10/18 (木) 12:25:04 - 八丈島のキョン Bouin'sで固定してますか？ PFAで固定したサンプルに比べると核の染まり方が劇的に改善されます。 精細管のステージを決定するためにはBouin'sで固定することが必須だと言われました。

(無題) 削除/引用 No.1031-2 - 2012/10/17 (水) 19:52:57 - おやじ これは僕も興味ありますね。 論文を読むと、核の形態とかでステージを決めているような感じが しますが、素人にはさっぱりわかりません。 専門家じゃないとわからないようなことを以前言われた気がしますが、 専門家になったのならどういう解釈をしているのかお聞きしたいです。 すみません、突然失礼しました。

精細管のステージ決定について 削除/引用 No.1031-1 - 2012/10/17 (水) 19:41:32 - ふぉー とある大学院生です。 パラフィン包埋した精巣を切って、各切片における精細管のステージを同定しようと思うのですが、HE染色がうまくいかずに困っています。 精母細胞などの核をクリアに染めたいのですが、なかなかステージの判定に使えるほどクリアに染めることができません。 みなさんは、どのように染色してステージを決定していらっしゃるのでしょうか？ もし、よろしければ教えていただけると助かります。 HE染色だけでなく、別の染色法でやっている方も教えていただけると助かります。

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