Bio Technical フォーラム

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クリューラーバレラ染色のLFBが弱い トピック削除
No.10359-TOPIC - 2022/03/23 (水) 11:28:58 - ozaki
脳のP21のクリューラーバレラ染色を行っています。
LFB(ルクソールファストブルー)の染色が弱く困っております。
染色の特異性はあるので、温度を上げるか染色の時間を延ばすことで対応可能かと思っています。
現在、下記のような染色手順で行っております。

1脱パラフィンキシレン3槽、各10分
2脱キシレン100%エタノール3槽、各5分
3浸水95%エタノール5分
4染色0.1%LFB染色液一晩、50℃
5洗浄95%エタノール1分
6流水洗水道水

改変すべき箇所やおすすめの反応時間などありますでしょうか。
 
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(無題) 削除/引用
No.10359-2 - 2022/03/23 (水) 12:20:16 - AA
染色後の脱色分別が行き過ぎなのではないでしょうか。
私はLFB直後の95%アルコールはすすぐ程度で、一旦検鏡してから0.05%炭酸リチウム水溶液、70%エタノールで分別するよう習いました。分別前は灰白質も真っ青なので目安はそこがしっかり白くなるまでです。

LFB直後でしっかり染まっていないなら染色液のpHが問題かもしれません。 

クリューラーバレラ染色のLFBが弱い 削除/引用
No.10359-1 - 2022/03/23 (水) 11:28:58 - ozaki
脳のP21のクリューラーバレラ染色を行っています。
LFB(ルクソールファストブルー)の染色が弱く困っております。
染色の特異性はあるので、温度を上げるか染色の時間を延ばすことで対応可能かと思っています。
現在、下記のような染色手順で行っております。

1脱パラフィンキシレン3槽、各10分
2脱キシレン100%エタノール3槽、各5分
3浸水95%エタノール5分
4染色0.1%LFB染色液一晩、50℃
5洗浄95%エタノール1分
6流水洗水道水

改変すべき箇所やおすすめの反応時間などありますでしょうか。

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