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タンパク質の分子量 トピック削除
No.10414-TOPIC - 2022/04/21 (木) 17:59:37 - あさごはん
タンパク質の分子量は抗体によって違うのですか?
 
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(無題) 解決済み 削除/引用
No.10414-16 - 2022/04/29 (金) 13:25:34 - あさごはん
みなさま、詳しいご説明ありがとうございます。
前駆体と成熟型で20kDaほどの違いがあるとのこと、
URLまでつけて説明くださりありがとうございました。

拙い文章での質問に答えてくださりありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.10414-15 - 2022/04/29 (金) 00:47:05 - おお
https://www.cellsignal.com/products/primary-antibodies/il-1b-antibody/2022

前駆体と成熟型で20kDaほどの違いがあるようです。それぞれの抗体がどの部分を認識するかによってどちらかだけしか見れない可能性もあります。たとえばmature IL-1β だけを検出するような抗体もあるようです(普通はmature IL-1βを認識する抗体は前駆体と共通した配列を認識するので両方見れる)。
https://www.cellsignal.com/products/primary-antibodies/cleaved-il-1b-asp116-d3a3z-rabbit-mab/83186

一度抗体を作った抗原はのアミノ酸がどの部分なのかなどご自身で確かめて、理論上どれを認識するのかなど調べてみることをおすすめします。

それ以外にも特異性の問題、非特異なバンドなども抗体ではついて回る問題です。

(無題) 削除/引用
No.10414-14 - 2022/04/28 (木) 22:11:15 - hjy
サンプルの組織はマウスの?、ラットの?、それともヒトの?

サンタクルスの方はたぶんマウス由来モノクローナル抗体と思いますが、Proteintechの方はマウス由来抗体ですか?、ウサギ由来抗体ですか?あるいはそれ以外ですか?

2つの抗体のwestern rnblottingで見えるそれぞれのシグナルの分子量を教えてください。

(無題) 削除/引用
No.10414-13 - 2022/04/28 (木) 17:56:32 - G25
抗体の違いじゃなくて、見てるアンプルが違うんじゃない?
前駆体と、cleaage後の成熟フォーム
両社のでデモンストレーション画像の違いはそれだと思うが。

P社の実験例では、LPSとprotein transport inhibitorで処理した細胞と注釈があるので、成熟が抑制されているのかも。

(無題) 削除/引用
No.10414-12 - 2022/04/28 (木) 17:04:29 - あさごはん
お返事が大変遅くなり申し訳ありません。
ある組織からタンパク抽出して、
例えばsanta cruzのIL1β抗体と
ProteintechのIL1β抗体でウエスタンブロットしたら、
バンドの位置が20kDaほど違うことはありますか?

(無題) 削除/引用
No.10414-11 - 2022/04/22 (金) 21:58:18 - ww
つっこみが殺到して質問者さんは出づらくなったかもしれないけど
ディスカッションのいい機会だと思って、自分の知りたいことを整理して再度質問してみてはいかが?

(無題) 削除/引用
No.10414-10 - 2022/04/22 (金) 10:13:26 - G25
いまだに質問者さんの聞きたいことは藪の中。

(無題) 削除/引用
No.10414-9 - 2022/04/22 (金) 09:33:25 - LPS
推測するに、投稿者の方は何かに対する抗体を購入しようとあちこちの業者のページに行って、示されているウェスタンの図を見て混乱されているのではないでしょうか。最近は、購入可能な抗体も増えましたが、添付されているデータがいい加減なのも、大手でもありますからね。ウェスタンに使ったサンプルが既に分解されているとか、そもそも特異性がおかしいんじゃないのって思わせるのとか。

(無題) 削除/引用
No.10414-8 - 2022/04/22 (金) 00:49:18 - おお
>[Re:2] あさごはんさんは書きました :
> 同じタンパク質でも抗体によって分子量は違うのですか?

Sometimes, yes.

(無題) 削除/引用
No.10414-7 - 2022/04/21 (木) 22:09:22 - あの
そうかも。G25さんの方が、良いエスパーかも。

(無題) 削除/引用
No.10414-6 - 2022/04/21 (木) 21:49:41 - G25
「ウェスタンブロットで、使う抗体が違うと同じタンパク質でも分子量の異なる位置にバンドが出るか」
という質問だと解した。

(無題) 削除/引用
No.10414-5 - 2022/04/21 (木) 21:34:13 - あの
エスパーで御質問の意味を推定すると、

  さまざまなIgGの分子量は、抗原タンパクが異なると異なりますか?

という質問かな。

もしそうなら
(詳しくは、免疫学の専門家の先生におまかせしますが)

多少は異なるけど、通常、実験等では無視しても良い程度の違い、
だと思います。

(無題) 削除/引用
No.10414-4 - 2022/04/21 (木) 21:16:48 - qq
当方、聞きたいことが理解できておりません。
「タンパク質」とはどのタンパク質なのでしょうか?それともタンパク質全般のことなのでしょうか?
「抗体によって」とはどういうことなのでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.10414-2 - 2022/04/21 (木) 18:14:03 - あさごはん
同じタンパク質でも抗体によって分子量は違うのですか?

タンパク質の分子量 削除/引用
No.10414-1 - 2022/04/21 (木) 17:59:37 - あさごはん
タンパク質の分子量は抗体によって違うのですか?

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