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(無題) 削除/引用 No.1051-4 - 2012/10/25 (木) 21:01:54 - ンンノ ご存知のことかと思いますが、ラベルとして使われるビオチンはビタミンの1種ですよね。

(無題) 削除/引用 No.1051-3 - 2012/10/24 (水) 13:48:42 - ~ >今回は抗体を作成して、その抗体をつかった検出を試みることが目的です。 実験系を作ろうとしている方ですので、先行研究は調査済みですよね。 すでに求めている情報は入手されていると思いますが。 >とある組織の切片上でそのビタミンがあるかどうかを >検出できるのでしょうか？ ELISAでの検出法をご存じなのですから、抗ビタミン抗体で他のアプリケーションに対応しているものがあるかも調べられていますよね。 調べられた通り、IHCに対応した抗ビタミン抗体は市販されています。 私が見かけたメーカーのものは、あまりきれいな写真が載っていませんでしたので、本当に検出できるかはすこし心配ですが。 また、すべての種・組織に対応しているとメーカーが言うことはまずありませんので、 ”とある組織”にも対応しているかを質問するのは無理があるでしょう。 >ELISAなどの方法になるのでしょうか？ほかにも >方法はありますでしょうか？ "など"に何が含まれるか次第です。 抽出後でもかまわなければ、ご自分で液クロを挙げられていますよね。 ELISAができる以上、RIAでもできるでしょう。 また、ビタミンは活性で測定する方法もありますし、学生実習でペーパークロマトで定量することもありますね。

(無題) 削除/引用 No.1051-2 - 2012/10/24 (水) 12:43:14 - み そもそもビタミンのような低分子量がエピトープになりえるのか疑問

ビタミンのような物質の免疫染色 削除/引用 No.1051-1 - 2012/10/24 (水) 11:55:45 - lalala いつも参考にさせて頂いております。 すみません、免疫染色やELISAなどに詳しい方いらっしゃいましたら、 教えて下さい。 例えばビタミンに対する抗体があれば、 免疫組織化学染色の方法を使い、 とある組織の切片上でそのビタミンがあるかどうかを 検出できるのでしょうか？ ビタミンは生体内で代謝され、その構造が変化しておりますし 変化した構造を抗体が認識できなければ検出できないことは 承知しております。 素朴な疑問ですが、たとえば水溶性の高い構造になった場合 組織をPBSwashとかしたら、流れていってしまうような気がしますが どうなのでしょうか？ 細胞内に取り込まれていたら検出できますか？アルコールなどで固定とか したら流れ落ちていってしまうのでしょうか？ やはり、ビタミンに対する抗体を用いて、組織にあるかどうかを 検出する場合は、ELISAなどの方法になるのでしょうか？ほかにも 方法はありますでしょうか？ 通常ビタミンなどの生体内分布を調べるときは 組織をホモゲナイズしたものや抽出してきたもので 液クロなどするとは思うのですが、今回は抗体を 作成して、その抗体をつかった検出を試みることが 目的です。何卒ご教授下さい。宜しくお願い致します。

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