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(無題) 削除/引用 No.1091-3 - 2012/11/05 (月) 01:14:13 - 名無し adultからでも普通に繊維芽細胞培養出来ます。いくつか方法がありますが、組織片をシャーレに置いて這い出してきた細胞を使うのと、ゴラゲナーゼなどで細胞をバラバラにしては種する方法があると思います。収量や細胞老化に至るまでの分裂回数はMEFやマウス胎児皮膚材料とは違うとおもいますが。

(無題) 削除/引用 No.1091-2 - 2012/11/01 (木) 23:01:23 - おお >[Re:1] fibroさんは書きました : > > ただ、当方MEFを作製したことがなく、できればadultのtailかどこからかのfibroblastで一度見てみようかと思います。そこで疑問なのですが、なぜ一般的にfibroblastと検索するとMEFが多く検索されるのでしょうか？adultであれば細胞分裂の回数に制限があるなどが問題でしょうか？？ > > アダルトマウスからfibroblastを（マウスを生かしたままで）単離・増殖させることは難しいのでしょうか？ 事情に精通しているとはいえませんが、アダルト(週れいによりますが、たぶん普通ひとケタの週れいだろうと)でもとれます。何ら難しいことはないと思います(肺や、胃、多分皮膚など、外的環境に接点がある臓器はコンタミしやすいというのはあるでしょうけど)。 あとは線維が細胞は分裂回数に制限があるので(細胞老化といいますが)若い方がいいです。分裂の制限といっても、一度細胞が増えにくくなり(細胞が大きくなってきたり細胞老化に特徴的な形態をしめすでしょうけど)、それを超えるとまた増えてくるようになります。これを不死化といいますが、マウスの場合それに気がつかないで増やしているケースもあるかもしれません。不死化すると細胞の状態も違う可能性があります。 ひとケタの週れいならそんなに不便に思うほど直ぐに老化にはならないと思いますけど、ちょっと具体的な数字はわかりません。

なぜadultではなくMEFなのか？ 削除/引用 No.1091-1 - 2012/11/01 (木) 22:21:40 - fibro みなさま稚拙な質問にどうか御付き合いいただきますと幸いです。 現在、私が興味を持つ蛋白質は、MEFで発現することが知られているため、 抗体のポジコンとしてMEFに注目しています。 ただ、当方MEFを作製したことがなく、できればadultのtailかどこからかのfibroblastで一度見てみようかと思います。そこで疑問なのですが、なぜ一般的にfibroblastと検索するとMEFが多く検索されるのでしょうか？adultであれば細胞分裂の回数に制限があるなどが問題でしょうか？？ アダルトマウスからfibroblastを（マウスを生かしたままで）単離・増殖させることは難しいのでしょうか？この辺の事情に精通しておられる方いらっしゃいましたらご意見いただけますと幸いです。 よろしくお願いします。

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