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FicollによるPBMC分離の際のブレーキについて トピック削除
No.1114-TOPIC - 2012/11/07 (水) 01:17:20 - protein
いつも勉強させていただいております。
お叱りを受けそうな質問で恐縮なのですが、
一般にFicollによるPBMCの分離の際にブレーキ無しの遠心を行いますが、
これは、
1.赤血球の層を乱さないためなのか、
2.PBMCを含む中間層がクリアに形成されるために必要なのか、
どちらなのでしょうか。

現在某社の、ブレーキONのままFicoll分離が可能と謳った
Leucosep tubeの改良版のようなものをテストしています。
プロトコールの最適化にあたり、ブレーキの意味を再度考えている次第です。

アドバイスいただけましたら幸いです。
 
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(無題) 削除/引用
No.1114-3 - 2012/11/09 (金) 06:57:54 - protein
おお様
いつもアドバイスをありがとうございます。
仰られるとおりと思いました。
といいますのも、そのチューブのオリジナルのプロトコルは
赤血球を除くすべての上清をデカントでチューブに移すというものでしたので。
デカントの方法では私の系では色々コンタミが多く、
結局現在は中間層をピペットで回収していまして、
この場合はブレーキはONのままいけるのかと疑問に思い、ここに質問させていただいた次第です。
どうもブレーキはOFFのままのほうがよさそうですね。
誠にありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.1114-2 - 2012/11/07 (水) 02:35:12 - おお
一般的にはステップワイズにしろグラジェントにしろ密度の違う上下の溶液が行き来したりして乱れないようにするためだと思います。ブレーキをかけてもいいというのは、勝手な推測ですが、ブレーキをかけてもその目的に対してそんなに乱れたりしないので十分実用に耐えれるということなのかもしれませんね。

FicollによるPBMC分離の際のブレーキについて 削除/引用
No.1114-1 - 2012/11/07 (水) 01:17:20 - protein
いつも勉強させていただいております。
お叱りを受けそうな質問で恐縮なのですが、
一般にFicollによるPBMCの分離の際にブレーキ無しの遠心を行いますが、
これは、
1.赤血球の層を乱さないためなのか、
2.PBMCを含む中間層がクリアに形成されるために必要なのか、
どちらなのでしょうか。

現在某社の、ブレーキONのままFicoll分離が可能と謳った
Leucosep tubeの改良版のようなものをテストしています。
プロトコールの最適化にあたり、ブレーキの意味を再度考えている次第です。

アドバイスいただけましたら幸いです。

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