Bio Technical フォーラム

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FACS buffer トピック削除
No.1142-TOPIC - 2012/11/12 (月) 00:51:58 - バッファー
いつも、参考にさせて頂いてます。
皆様のラボでFACSを行う際にどのbufferを用いますか？

私のラボではHBSSを使用する方と、2% FCS in PBSを使用する方がいます。

論文などを参考にすると、どちらの方法も見受けられるのですが…。

測定する際のバックグラウンドにFCSは影響するようにも思えたりもしています。

皆様のラボではどのような理由でbufferを使用していますか？
　
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状況により 削除/引用
No.1142-3 - 2012/11/12 (月) 10:41:55 - ema
非特異抗体反応を防ぐ軽いマスキングの意味も有るのでPBS,HBSS単独では処理しません。Fcレセプター抗体もいれますが。
こちらでは、簡単なWashでは2% FCS in PBS（-）を使うこともあります。が。最後のところでは0.5％BSA in HBSSでFACSしています。Fcレセプター抗体もいれます。
BSAはやはり高価ですし、FCSなら培養用で大量に買った研究室のものをちょっと使用すれば良いので何の実験をしたいのか、価格、研究室でなにを持っているかのバランスでセレクトします。

(無題) 削除/引用
No.1142-2 - 2012/11/12 (月) 05:39:25 - おお


FACSは実際は実験をしたことはありませんが、バックグランドについてはご自分でFCSあるなしで流してみて感触だけでも得ておけばいいかと。データーとして持っておけば何かと判断材料にはなるでしょうから(ロットさがどの程度出るか分からないですけど)。

FCSを入れた場合従来接着性のある細胞であれば、2個とか複数の細胞の塊の割合が増えるかもしれません。FCSの刺激を避けたいかどうかも判断基準になるかもしれませんね。

FACS buffer 削除/引用
No.1142-1 - 2012/11/12 (月) 00:51:58 - バッファー
いつも、参考にさせて頂いてます。
皆様のラボでFACSを行う際にどのbufferを用いますか？

私のラボではHBSSを使用する方と、2% FCS in PBSを使用する方がいます。

論文などを参考にすると、どちらの方法も見受けられるのですが…。

測定する際のバックグラウンドにFCSは影響するようにも思えたりもしています。

皆様のラボではどのような理由でbufferを使用していますか？
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