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Stable作成の際の限界希釈の作り方 トピック削除
No.11496-TOPIC - 2023/06/06 (火) 11:22:13 - EETT
培養細胞のStable作成を試みています。

限界希釈の仕方が良く分からなくなったのですが、どうしたらいいのでしょうか。

single cellにするとほとんどの細胞は増えません。増やし方のコツ等ありますでしょうか。


しゃぶしゃぶにしても、2 clone取るリスクも結構あるのかなと思っているのですが、どうやって、single clone由来の確証が持てるものなのでしょうか。
 
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(無題) 削除/引用
No.11496-2 - 2023/06/06 (火) 12:06:18 - おお
浮遊系ですか?接着系ですか?

コンディションメディアを使うと生存率が上がる場合がまあまああります。接着細胞であればコラーゲンやそのほかのマトリクス成分をコートするというのも選択肢でしょう。

接着系なら10cmに100個程度まいて、クローンから生じたコロニーをピックアップするというのもありです。

>2 clone取るリスクも結構あるのかなと思っているのですが、どうやって、single clone由来の確証が持てるものなのでしょうか。

96Wellプレートにまいて、目視で一つであることを確認するまで確証は持てない。

Stable作成の際の限界希釈の作り方 削除/引用
No.11496-1 - 2023/06/06 (火) 11:22:13 - EETT
培養細胞のStable作成を試みています。

限界希釈の仕方が良く分からなくなったのですが、どうしたらいいのでしょうか。

single cellにするとほとんどの細胞は増えません。増やし方のコツ等ありますでしょうか。


しゃぶしゃぶにしても、2 clone取るリスクも結構あるのかなと思っているのですが、どうやって、single clone由来の確証が持てるものなのでしょうか。

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