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レンチウイルスを感染させた細胞のBSL
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No.11645-TOPIC - 2023/07/24 (月) 00:16:33 - EETT
レンチウイルスを感染させた細胞からStableを作製する予定ですが、長期培養した後の細胞のバイオセイフティーレベルってどうなるのかご存知でしょうか。
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No.11645-8 - 2023/07/25 (火) 07:28:41 - おお
必要なら残留ウイルス粒子のTiterを測ることをお勧めします。
(無題)
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No.11645-7 - 2023/07/25 (火) 05:43:02 - おお
前述の記載をよく読んでください。
レンチウイルスベクターのウイルス粒子は感染後にウイルスは産生しないと申し上げています。
レンチウイルスベクターのウイルス粒子の場合ステイブルを作るのに長期間かかるとは限りませんけど。感染効率が良ければ薬剤選択してもほとんど死なないこともある。
接着細胞なら、はがすときにトリプシン処理するし残存ウイルスは不活化されるだろうし、凍結ストック用に増やす間に(ほぼ)完全に除去できるんじゃないですか?
(無題)
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No.11645-6 - 2023/07/25 (火) 04:59:32 - EETT
レンチウイルスでStableを作製してから、その細胞をマウスに注入することを考えています。
この場合、Stableを作製するまでに、長期間かかると思いますが、移植時にレンチウイルスがマウスに感染するということはあるのでしょうか。
(無題)
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No.11645-5 - 2023/07/25 (火) 04:47:52 - おお
レンチウイルスはベクターとしてでなくて、感染性のレンチウイルスを扱うという事ですか?よく実験で使われるレンチウイルスベクターはそれ自身増殖しないように作られてますが、、、ただし、可能性として(ほとんどないとしても)作成時にリコンビネーションがおこると増殖可能なウイルスはできるという懸念はあります。
(無題)
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No.11645-4 - 2023/07/25 (火) 04:41:05 - EETT
一度、細胞にレンチウイルスを感染させたら、どれくらいで感染能は続くんでしょうか。stableを作製してから、マウスにレンチが作用するということはありますか。
(無題)
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No.11645-3 - 2023/07/25 (火) 02:21:54 - おお
例えば、HCT 116はATCC基準ではBSL1
https://www.atcc.org/products/ccl-247
それをpLentiCRISPRv2でKOした細胞はBSL 2 です。
https://www.atcc.org/products/crl-3483
念のため施設ごとに基準を設けていると思いますので、担当部署あるいは責任者などに聞いてみてください。
Lentiで感染させる作業はBSL2ですし、感染できるならそのまま維持は可能かと思います。
(無題)
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No.11645-2 - 2023/07/24 (月) 08:32:31 - ss
わかりかねますが、BSL2以上の部屋であれば問題ないと思います。
レンチウイルスを感染させた細胞のBSL
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No.11645-1 - 2023/07/24 (月) 00:16:33 - EETT
レンチウイルスを感染させた細胞からStableを作製する予定ですが、長期培養した後の細胞のバイオセイフティーレベルってどうなるのかご存知でしょうか。
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