初めまして。
マウスMSCを用いた実験で軟骨の分化を行っていますが、Pellet法、Micromass culture法の両方で試み、細胞は凝集してSpheloidは形成されますが、その後増大しません。
培地の組成は基本はPMID: 20203670 DOI: 10.1038/nprot.2009.238のプロトコール(10-7 Mデキサメタゾン、1%(vol/vol)ITS、50μMアスコルビン酸-2-リン酸、1 mM ピルビン酸ナトリウム、50 µg ml-1 (wt/vol) プロリン,20 ng ml-1 (wt/vol) TGF-β 高グルコースD-MEMを500μl)で行っておりますが、何か原因として考えられるものを御経験のある方御教授願えますでしょうか。
初学者で拙い説明と思いますが何卒宜しくお願い致します。 |
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