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Suspension cellをsingle clone化するには。 トピック削除
No.11674-TOPIC - 2023/08/01 (火) 14:49:55 - UTR
タイトルの通りです。Suspension cellをsingle clone化するには限界希釈をするのだと思いますが、single cellまで希釈すると細胞が死にます。また、生きていても本当にsingleなのか、確証が持てないのですが、どうするのがいいのでしょうか。
 
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(無題) 削除/引用
No.11674-6 - 2023/08/04 (金) 12:01:04 - 774
セルカルチャーインサートを使う。

(無題) 削除/引用
No.11674-5 - 2023/08/01 (火) 20:58:50 - ema
https://www.iwai-chem.co.jp/products/tok/sievewell/
のような製品があります。

(無題) 削除/引用
No.11674-4 - 2023/08/01 (火) 15:53:33 - G25
conditioned mediumを使う
feeder cellと共培養する

(無題) 削除/引用
No.11674-3 - 2023/08/01 (火) 15:10:27 - おお
>[Re:1] UTRさんは書きました :
> タイトルの通りです。Suspension cellをsingle clone化するには限界希釈をするのだと思いますが、single cellまで希釈すると細胞が死にます。

Conditioned mediumとか、血清濃度を少し上げるとか、最近ではrock inhibitor y-27632とかも使われるのではないでしょうか。ちょっと変わったやり方としてはソフトアガーやCarboxymethylcellulose (だったけ)でコロニーが出来てからピックアップする。

>また、生きていても本当にsingleなのか、確証が持てないのですが、どうするのがいいのでしょうか。
>

まいた時点の目視が確実ですが、目で見ても信じられないということですか?

(無題) 削除/引用
No.11674-2 - 2023/08/01 (火) 15:05:29 - 774R
細胞が分泌する物質が互いの生育に必要なのかもしれません。
Freshな培地ではなく、通常密度の細胞を培養した培地を混ぜて使用してもダメですか?
浮遊細胞ではなく接着細胞を96wellプレートでclone化する時にこれでうまくいったことがあります。

Suspension cellをsingle clone化するには。 削除/引用
No.11674-1 - 2023/08/01 (火) 14:49:55 - UTR
タイトルの通りです。Suspension cellをsingle clone化するには限界希釈をするのだと思いますが、single cellまで希釈すると細胞が死にます。また、生きていても本当にsingleなのか、確証が持てないのですが、どうするのがいいのでしょうか。

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