Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

Hoechst 33342 ミトコンドリア トピック削除
No.11684-TOPIC - 2023/08/04 (金) 08:54:50 - BX
当方、細胞染色は素人なのですが、Hoechst 33342でCandida albicansを染めるとミトコンドリアDNAが緑のチャンネル(おそらくFITC)で観察できるとの情報を一報だけみつけたのですが、本当ですか?
その一報は、細胞内のなにかが緑に染まっているデータはだしているのですが、MitoTrackerとの共局在も調べてないし、channel名前も書いてないし、「ミトコンドリアDNAはHoechst 33342で緑に光る」と書いてあるのに参考文献も示していないので全然信憑性がないのです。

真菌でなくてもいいので、そういった現象はHoechst界隈?においては(参考文献を示す必要がないほど)常識なのか教えていただけませんでしょうか。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



6件 ( 1 〜 6 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.11684-7 - 2023/08/04 (金) 19:30:07 - egeria
カンジダでもHoechstでもないですが、出芽酵母の生細胞にDAPIをかけるとミトコンドリアDNAが特異的に染まるという現象なら知っています。数十年前から利用されていて、わざわざ参考文献を示すことは少ないですね。なお、どういうメカニズムなのかはたぶん不明なままだと思います。

関係あるかわかりませんが。

(無題) 削除/引用
No.11684-6 - 2023/08/04 (金) 12:51:11 - かん
出芽酵母と分裂酵母のHoechst染色ではミトコンドリアは染まりません。
酵母のミトコンドリあは形が特徴的なので、染まればすぐわかりますが、核がドミナントに光ります

(無題) 削除/引用
No.11684-5 - 2023/08/04 (金) 12:41:36 - G25
当該文献が示されていない上に、翻訳、解釈にあなたのフィルターがかかっているので、著者が正確になんと言っているかわからない。

本当に「ミトコンドリアDNAはHoechst 33342で緑に光る」と書いているのだろうか? 例えばレーザー共焦点で観察したなら、チャンネルが何であれ、実際は色彩をもたない輝度だけで検出していて、表示の上の色は擬似カラーでしょ。そして実際の蛍光波長と同じ疑似カラーをあてないといけないという決まりもない(見やすさのためあえて実際の波長域でない色を当てることもある)。だから、著者は「ミトコンドリアを染めているHoechst 33342を緑で表示した」と言っているだけじゃないかとも思えるのです。
原著、原文がわからないから、そういう可能性も疑えるのです。

(無題) 削除/引用
No.11684-3 - 2023/08/04 (金) 12:20:41 - 774R
いつも思うことだけど、なぜ、こういうときにそれが記載された論文を提示しないのか謎なんだよね。

(無題) 削除/引用
No.11684-2 - 2023/08/04 (金) 10:31:08 - YK
論文(サイト?)見ないとなんとも言えないですが、Hoechst自体、青色蛍光色素で励起ー蛍光波長が決まっているのでありえないですけどね。

一応、Hoechstの蛍光スペクトル調べてもらえるとわかりますが、緑色(490-550nm)でも弱ーく発光している(いわゆる蛍光漏れ)ので、これを露光時間を長くして強調し光っていると解釈した可能性はあります。

Hoechst 33342 ミトコンドリア 削除/引用
No.11684-1 - 2023/08/04 (金) 08:54:50 - BX
当方、細胞染色は素人なのですが、Hoechst 33342でCandida albicansを染めるとミトコンドリアDNAが緑のチャンネル(おそらくFITC)で観察できるとの情報を一報だけみつけたのですが、本当ですか?
その一報は、細胞内のなにかが緑に染まっているデータはだしているのですが、MitoTrackerとの共局在も調べてないし、channel名前も書いてないし、「ミトコンドリアDNAはHoechst 33342で緑に光る」と書いてあるのに参考文献も示していないので全然信憑性がないのです。

真菌でなくてもいいので、そういった現象はHoechst界隈?においては(参考文献を示す必要がないほど)常識なのか教えていただけませんでしょうか。

6件 ( 1 〜 6 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。