いつもお世話になっております。
分散培養の神経神経初代培養にプラスミドをトランスフェクション(TF)をしているのですが、培養開始から4〜5日まではそこそこ入るのですが、1週間を過ぎると極端に効率が悪くなり、細胞毒性も出てきます。
非分裂細胞ではプラスミドが細胞内に入っても核移行しないため発現しにくいと言われており、in vitro転写したmRNAをTFする方法があると聞きました。
細胞種を問わず、実際にmRNAのTFをやったことのある方いらっしゃいますか?
どこのキットが良いとか教えていただけないでしょうか。
細胞毒性に関して、毒性が出にくいシュードウリジンを使う(コロナワクチンの様な)キットとか市販されてないものでしょうか。 |
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