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(無題) 削除/引用 No.11700-4 - 2023/08/12 (土) 01:58:38 - おお >[Re:3] YKさんは書きました : > ありがとうございます。 > プロモーターには解糖系などの強力なものを使おうかと思っています。 > > ちなみに本来の遺伝子由来以外のプロモーター（他種遺伝子のプロモーター） > につなげた場合もスプライシングはきちんと起こるでしょうか。 例えばヒトやマウスの発現ベクターで、人工的なスプライシングサイトを挿入して発現を安定させるようなものもあります。また、CMVのプロモーターなどに興味ある遺伝子（ゲノミック）を挿入してスプライシングの制御を見るような方法論もあります。 そういう視点では起こるといえば起こると思います。一方、選択的スプライシングが起こるような場所ではプロモーターの強さ、あるいはそれによるポリメラーゼの転写速度などが影響するという研究もあります。 わからないのは脊椎動物では幅広い種に共通したconstructsが使えたりしますが、酵母類に関してはどうなのかわかりません。たとえば、 Saccharomyces cerevisiaeとSchizosaccharomyces pombeではスプライシングに関する遺伝子組成がだいぶ違います。

(無題) 削除/引用 No.11700-3 - 2023/08/11 (金) 11:11:07 - YK ありがとうございます。 プロモーターには解糖系などの強力なものを使おうかと思っています。 ちなみに本来の遺伝子由来以外のプロモーター（他種遺伝子のプロモーター） につなげた場合もスプライシングはきちんと起こるでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.11700-2 - 2023/08/11 (金) 10:36:45 - あああ 問題ないとは思いますが、コピー数に依存するだけだから大量には発現しないんじゃないですか。

酵母での遺伝子発現 削除/引用 No.11700-1 - 2023/08/11 (金) 08:24:37 - YK ある酵母で自身がもつ遺伝子を大量発現させたいと思っています。 この酵母の遺伝子にはイントロンが多いのですが、同じ酵母で発現させる場合 遺伝子ソースとしてゲノムDNAからPCR増幅しても問題ないでしょうか。 同種の酵母で発現させる場合、cDNAから増幅している例もありましたので 気になりました。 プロモーターは自身の遺伝子を利用しようと考えています。 よろしくお願いいたします。

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