お世話になっております。
現在、B6マウスの肝臓からリンパ球を取り出しFACSなど行なっているのですが、肝臓の処理段階で疑問があり投稿させていただきました。
肝臓からリンパ球を取り出す方法としましては、ステンレスメッシュで肝臓をすり潰し50xg,5分間遠心し上清を回収後PBSにて洗浄。その後40％Percollに再浮遊、70％Percollに重層させ2100rpm,20分で遠心し目的の細胞群を回収しております。
ここで質問させていただきたいのですが、Percoll処理後に赤血球が残存することがよくあります。Percoll後の細胞群回収時には、赤血球は無いように見えるのですが、洗浄のため回収し遠心すると赤血球を多く含んだペレットが出現してしまいます。通常、Percoll処理後はペレットに現れるほどの赤血球は残存しないと思うのですが(脾臓、腎臓で確認済みです)、なにか臓器による原因があるのでしょうか？
また現在取り組んでいる対策としましては、Percollの本数を増やしております。他に対策などがございましたら、ご教授いただきたく存じます。
拙い文章で大変申し訳ございませんが、何卒よろしくお願いいたします。
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