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(無題) 削除/引用 No.11779-2 - 2023/09/15 (金) 01:32:19 - おお 浮遊性細胞ということなので、血球系の細胞ですか？ 血球系の細胞はＣＭＶではあまり強く発現しないという話を聞きます。なのでほかのプロモーター（EF1など）がよく使われるみたいです。 なんかそれを反映しているような気がします。

レンチウイルスで感染させた細胞の評価 削除/引用 No.11779-1 - 2023/09/14 (木) 10:34:23 - DCC レンチウイルスを使った実験を予定していて、まずはコントロールでの感染を行いました。幸い、お金のあるラボなので、コントロールのレンチウイルスは市販のものを購入しました。>108のタイターがあります。 浮遊性細胞をターゲットに、まずは、手始めに、4MOIで実験を行ったのですが、蛍光の評価に難渋しています。以下に具体的な内容を書きます。 ベクターは、pLV-CMV-EGFP-Puro;EF1A-mCherryとなっているので、普通に考えたら、EGFPもmCherryも両者ともに発現するはずなのですが、EGFPはほとんど陽性細胞は見られず、mCherryの蛍光だけ見られます。Puroと融合しているため、EGFPが極めて弱いとも考えたのですが、CMVがプロモーターなので、そこまで弱くなるのかなと言う気がしています。 上記のようなことは起こりうるでしょうか。実はレンチを扱うのが初めてなので、何か知らないことがあるのではとも愚考しています。そもそも何故2色のベクターがコントロールなのが少し謎なのですが、2色で確認したいだけで深い意味はないと捉えています。

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