Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

細胞培養における酵母菌のコンタミ トピック削除
No.11857-TOPIC - 2023/10/17 (火) 17:16:41 - ぽみみ
現在、細胞培養をしている大学生です。

ここ最近、急に酵母菌のコンタミに悩まされています。
培地に問題があるのかと思い、培地のみをインキュベートしても問題はなく、
電動ピペッターが汚染されてしまっているのかと思い、他のピペッターを使ってみても酵母がコンタミしてしまいました。

他にどのようなコンタミの可能性があるのか、わかる方がいらっしゃいましたら、教えていただきたいです。
また、酵母によるコンタミの経験がある方のお話もお聞きしたいです。
よろしくお願いいたします。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



18件 ( 1 〜 18 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.11857-18 - 2023/10/20 (金) 21:03:31 - U
入手が困難な特殊な細胞なのですか。

(無題) 削除/引用
No.11857-17 - 2023/10/20 (金) 13:28:09 - か
そもそもコンタミではなく、何かが沈澱してるということはない?

培地は黄色くなりますか?

(無題) 削除/引用
No.11857-16 - 2023/10/20 (金) 12:10:57 - あり
本筋とは関係ないですし、誰かの揚げ足取りでもないですが、経験者としてただのおもしろ現象を共有しておきます。
・Candida albicansは液体培地に0.5%のエタノールが混入するだけで死滅しました。
もちろん酵母の種類・株によってエタノール耐性は異なりますし、培養条件にも依存します。
以上、ただの雑談でした。

(無題) 削除/引用
No.11857-15 - 2023/10/19 (木) 09:05:43 - G25
アルコール消毒について
https://www.thcu.ac.jp/uploads/imgs/20190605090207.pdf
https://www.maruishi-pharm.co.jp/assets/pdf/syoudoku_biseibutsu.pdf

(無題) 削除/引用
No.11857-14 - 2023/10/19 (木) 08:12:43 - あの
そういう意見が来るだろうなとは思っていました。

まあ、そのとおりですし、70%で、きっちりと全部 処理できれば良いのでしょうけど。

(無題) 削除/引用
No.11857-13 - 2023/10/19 (木) 07:30:42 - Skeptics
このmini-reviewで論じられているエタノール耐性は醸造過程におけるもので、10%かせいぜい20%程度のエタノールに対する耐性だと思います。

>[Re:12] あのさんは書きました :
> 酵母ってエタノール耐性ですが。
>
>
> https://www.sbj.or.jp/wp-content/uploads/file/sbj/9308/9308_tokushu_2.pdf

(無題) 削除/引用
No.11857-12 - 2023/10/18 (水) 18:24:35 - あの
酵母ってエタノール耐性ですが。


https://www.sbj.or.jp/wp-content/uploads/file/sbj/9308/9308_tokushu_2.pdf

(無題) 削除/引用
No.11857-11 - 2023/10/18 (水) 14:35:48 - ぽみみ
あの 様
ご質問、ありがとうございます。

クリーンベンチの内側についてないか。
→アルコール消毒はしました。
もしついている場合には、培地のみをインキュベートした際にも混入すると考えられますが、培地のみでは問題ありませんでした。


酵母は扱っているか。
→扱っていません。先生も何十年間も培養してきて、初めて見たとおっしゃっていました。

酵母と判断した理由は何か。
→コンタミの実例で出てきた、酵母の写真を見て判断しました。(見た目)
また、酵母に効く抗生物質は培地に含まれていないので、酵母だと思っています。

(無題) 削除/引用
No.11857-10 - 2023/10/18 (水) 13:07:02 - あの
以下2点の疑問がありますが、クリーンベンチの内側の壁などがコンタミしている可能性は無いですか?


 同じ部屋、同じクリーンベンチで酵母を使っていますか?


 酵母のコンタミと判断した理由は何ですか?

(無題) 削除/引用
No.11857-9 - 2023/10/18 (水) 09:51:40 - ぽみみ
回答いただき、ありがとうございます。

しかし、PBS、トリプシンともに使用しておりません。。
凍結しているストックの細胞にいるのですかね。。

(無題) 削除/引用
No.11857-8 - 2023/10/18 (水) 05:22:09 - たこ
培地のみ
培地+PBS
培地+トリプシン(ほんまかいなと思いましたが、トリプシンがやられているというレアケースもありました。)
それで問題ないのならインキュベーター停止&除菌清掃
ののちに
培地PBSトリプシン等を全て新しいものにして、ストックから起こし直してやり直していました。
tgyh78さんのおっしゃるようにストック自体がやられているケースもありえますね。
抗真菌薬ですが、私は外科切除検体を使用していたときにprimosinを突っ込んでおりました。
レア症例だから絶対生やしたいという細胞がこんたみしていたもの、の最終的には除染(?)できたケースもいくつかありました。

ストックが全部やられている場合、購入できる細胞なら再購入するのが一番手っ取り早いと思いますが。

(無題) 削除/引用
No.11857-7 - 2023/10/18 (水) 00:45:24 - おお
インキュベーターの中に感染源がある場合も。

(無題) 削除/引用
No.11857-6 - 2023/10/17 (火) 22:32:40 - tgyh78
もともと真菌に感染した細胞を使用していれば、いまさらどこをどのように完璧にしても時間と労力の無駄なので、あらたに細胞を購入するか、(汎用されているものならば)誰かからもらうか、するのが賢明と思います。従来のようなG+菌、G-菌に加えて真菌用の抗生剤も入った細胞培養用抗生剤混合液も市販されていますので、今後はそう行ったものを使用されることを勧めます。

(無題) 削除/引用
No.11857-5 - 2023/10/17 (火) 21:42:57 - G25
生ビールは安心してください。酵母は取り除かれていますよ。
酵母を残している無濾過ビール(酵母入りビール)は危険。
というのも冗談。
多分コンタミしているのはビール酵母(Saccharomyces)じゃなくてCandidaかなんかでしょう?
抗真菌剤でも使ってみる?

(無題) 削除/引用
No.11857-4 - 2023/10/17 (火) 20:47:37 - ぽみみ
ご回答いただき、ありがとうございます。
記していなかったのですが、PBSは使用していないので、他のことが原因かと思われます。。

(無題) 削除/引用
No.11857-3 - 2023/10/17 (火) 20:31:46 - qq
むかーしのハイブリドーマ作成のFAQに、前日に生ビールを飲んじゃだめというのがあったと聞いたことがあるけど、まあ冗談の一種でしょう。

(無題) 削除/引用
No.11857-2 - 2023/10/17 (火) 17:54:38 - 774R
培地も機器も全部OKで、結局、継代の時に使うPBSがコンタミしてた大学院生いたことを思い出しました。

細胞培養における酵母菌のコンタミ 削除/引用
No.11857-1 - 2023/10/17 (火) 17:16:41 - ぽみみ
現在、細胞培養をしている大学生です。

ここ最近、急に酵母菌のコンタミに悩まされています。
培地に問題があるのかと思い、培地のみをインキュベートしても問題はなく、
電動ピペッターが汚染されてしまっているのかと思い、他のピペッターを使ってみても酵母がコンタミしてしまいました。

他にどのようなコンタミの可能性があるのか、わかる方がいらっしゃいましたら、教えていただきたいです。
また、酵母によるコンタミの経験がある方のお話もお聞きしたいです。
よろしくお願いいたします。

18件 ( 1 〜 18 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。