BioTechnicalフォーラム [M13ファージの廃棄方法について]

M13ファージの廃棄方法について

No.11871-TOPIC - 2023/10/23 (月) 20:18:03 - ｳﾜｰｯ

M13ファージを使用されている方に質問です。

これからファージディスプレイを始めようと思うのですが、廃棄方法がわかりません。

説明書によるとオートクレーブでは不活化しないが、2%の漂白剤で1時間つけておけば不活化すると書かれていました。
普段チップ類や大腸菌プレートなどはオートクレーブにかけた後袋を密閉して廃棄しているのですが、
M13ファージを使用したプレート、チップなどに対しては別の不活化方法を取るべきなんでしょうか？(全部ハイターに漬けるとか？)
具体的にどうすればいいのかイメージできません…

皆様がどう廃棄されているのか教えて頂けましたら幸いです。
　

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No.11871-8 - 2023/11/02 (木) 11:57:42 - G25

>M13ファージは20分のボイルで不活性化するようです。

それはvirionとして感染性を失うという意味での不活性化ですね。
ただDNAウイルスなので、ゲノム核酸が直接宿主に取り込まれても、感染性のウイルスが出来てくるのです。
by accident, by chanceでファージゲノムDNAが細菌に取り込まれないとも限らないし（類似の現象は自然界に多くの例がありますね）、実験室で形質転換の系にコンタミでもしたら、かなり確実にそういうこと起こります（昔、もらってきたプラスミドで形質転換したらtransoformantのコロニーがプラークに侵されたことがあった。たぶんT系ファージだと思うけど、以来、ラボの大腸菌ワークが不調に）。

だから核酸自体を不活性化する方法が求められるということですね。

(無題)

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No.11871-7 - 2023/11/02 (木) 11:33:37 - Unknown

下の文献によると、M13ファージは20分のボイルで不活性化するようです。

ttps://link.springer.com/article/10.1007/s12257-012-0776-9

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No.11871-6 - 2023/10/31 (火) 19:39:41 - ｳﾜｰｯ

おお様

アドバイス頂きましてありがとうございます。
ハイターを用意しておいて使用した後すぐに吸っておけば確実に不活化させられますね。操作としてのイメージも湧くので実際に行うときはそうしてみます。

老兵様

体験談を頂きましてありがとうございます。
自分もコンタミを起こさない様気をつけて行いたいと思います。

(無題)

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No.11871-5 - 2023/10/31 (火) 10:30:42 - 老兵

そうだったんですね。昔、M13を使っていたときにはチップもそのまま机の上のチップ捨てに捨てるような扱いをしていましたが、コンタミで困った経験はありませんでしたが。

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No.11871-4 - 2023/10/31 (火) 07:53:33 - おお

チップとかは実験の時にハイターを用意しておいて、使った直後にパイペットにつけたままハイターを吸い出ししておけばためて後でつけて溶液が入り込ます取り残しがあるというのは防げると思いますがどうでしょうか。

ファージは知らない間に増えていたらえらいことになりかねないですからね。

(無題)

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No.11871-3 - 2023/10/31 (火) 07:41:34 - ｳﾜｰｯ

のなめ様

オートクレーブはよくないのですね、
お教え頂きましてありがとうございます。

ハイターに漬けて処分するようにします。