全5件 ( 1 〜 5 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.11972-5 - 2023/12/05 (火) 02:40:15 - おお 細胞の場合私は時間は気にしてません、ピペッティングでなんとかするか、チップの先で擦るか。 気になるならスクレーパーとか使ってもいいかと思います。RNA抽出用に何本かキープして再利用してもいいかもしれません（フェノールなどのWasteをどうするかというのはありますが）。

(無題) 削除/引用 No.11972-4 - 2023/12/05 (火) 00:53:00 - あの Trizolの処理時間は、組織からの抽出の際には15分ぐらいは置くので、 プレート底全面にかかっているなら、細胞でもそのぐらい置いても大丈夫と考えています。 節約したいときは、少なくとも底面積の70%ぐらいはかかっているようにして、手で揺すりながら、チップで引っ掻きます。 プレートの数が多くて、人手が足りないときは、時間などは結構　ばらついても気にしないことにしています。 シェーカーやボルテックスの時間も、1分前後にしていますが、ばらついても気にしないことにしています。 ちなみに、RNAの収量に影響するのは、チューブ等への吸着ロスと、アルコール沈殿の沈殿物の量です。低吸着グレードのチップやマイクロチューブ、ニッポンジーン社のエタチンメイトの使用をしています。

(無題) 削除/引用 No.11972-3 - 2023/12/04 (月) 23:15:38 - pom あのさんご回答ありがとうございます。trizol添加後の時間はあまり関係ないのでしょうか？また、プレートシェイカーやボルテックスはどれくらいしたらいいですか？

(無題) 削除/引用 No.11972-2 - 2023/12/04 (月) 23:04:44 - あの プレートごと、プレートシェーカー(あるいは普通のボルテックス)で撹拌する。 それから、チップなどで、ひっかく。タテヨコ、のの字で。

RNA抽出時のTRIzolによる細胞の溶解がうまくできない 削除/引用 No.11972-1 - 2023/12/04 (月) 20:00:39 - pom 12 well plateに播種した細胞のRNA抽出をTRIzolによって行っているのですが、plateの細胞がなかなか溶解しません。ピペッティングをしても細胞が剥がれず底に残っています。しばらく時間をおいてもあまり変わりません。TRIzolを添加してからどらくらい待つのが普通なのでしょうか。また、細胞を無駄なく回収するコツなども教えていただきたいです。

全5件 ( 1 〜 5 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---