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MSCへの遺伝子導入 トピック削除
No.11999-TOPIC - 2023/12/11 (月) 20:25:01 - MSC
間葉系幹細胞(MSC)への遺伝子導入のためにレンチウイルスを用いています。
具体的にはGFPとルシフェラーゼの融合タンパク質の遺伝子導入を行っております。
しかしながら、遺伝子導入効率が悪く in vivo imagingでの検出が困難であります。
そこでGFPとルシフェラーゼの融合タンパク質のMSCへの導入効率を上げたいのですが、何か良い方法はありませんでしょうか?
レンチウイルスのタイターを挙げるためにLentiblast premium等使用したこともありますが、GFPの蛍光観察からも遺伝子導入効率が良いように思いませんでした。。。

宜しくお願い致します。
 
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in vivo imaging 削除/引用
No.11999-7 - 2023/12/13 (水) 20:25:15 - ema
GFPとルシフェラーゼの融合タンパク質のMSCへの導入効率
in vivo imagingではルシフェラーゼはともかくGFPは非常にバックが高く良くないのですが、本当に良いのですか?皮膚だろうが尿だろうが餌だろうが波長がかぶって見にくい。

(無題) 削除/引用
No.11999-6 - 2023/12/13 (水) 08:28:37 - 組織消化
セルラインになっているならわずかなレンチ感染細胞を薬剤選択して樹立することは可能と思います。プライマリならAAVがおすすめです。

(無題) 削除/引用
No.11999-5 - 2023/12/13 (水) 04:17:35 - おお
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3659678/
https://www.liebertpub.com/doi/10.1089/hum.2022.117
こんなんあったわ

(無題) 削除/引用
No.11999-4 - 2023/12/12 (火) 10:20:15 - MSC
ヒト由来MSCです。
プライマリではありません。
アデノですか?AAVではなくでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.11999-3 - 2023/12/12 (火) 00:53:14 - 組織消化
マウスの組織由来のプライマリ細胞ですか?
ならtransfectionもlentiでの感染も極めて困難です。
アデノがいいのではないでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.11999-2 - 2023/12/11 (月) 22:57:53 - おお
Moiというか、ウイルス量上げれんのか?

MSCへの遺伝子導入 削除/引用
No.11999-1 - 2023/12/11 (月) 20:25:01 - MSC
間葉系幹細胞(MSC)への遺伝子導入のためにレンチウイルスを用いています。
具体的にはGFPとルシフェラーゼの融合タンパク質の遺伝子導入を行っております。
しかしながら、遺伝子導入効率が悪く in vivo imagingでの検出が困難であります。
そこでGFPとルシフェラーゼの融合タンパク質のMSCへの導入効率を上げたいのですが、何か良い方法はありませんでしょうか?
レンチウイルスのタイターを挙げるためにLentiblast premium等使用したこともありますが、GFPの蛍光観察からも遺伝子導入効率が良いように思いませんでした。。。

宜しくお願い致します。

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