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(無題) 削除/引用 No.12026-9 - 2023/12/22 (金) 09:13:29 - ほーきんす 自分の確認不足で大変失礼いたしました。 ご指摘いただきありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.12026-8 - 2023/12/22 (金) 03:05:28 - おお >[Re:7] G25さんは書きました : > 今、PRO-PREPをお使いなんでしたらそれを使ったらいいじゃないですか。PRO-PREPは培養細胞専用というわけではなかろう。 > https://intronbio.com:6001/inc/downfile.php?filename=F1524181530.pdf&orgfilename=IDR-RP0028_PRO-PREP.pdf&filedir=product_protocol ちゃんと組織からの抽出ほうほうかいてある、、、その製品使っていて読んだこともないと言う事？

(無題) 削除/引用 No.12026-7 - 2023/12/21 (木) 19:33:56 - G25 今、PRO-PREPをお使いなんでしたらそれを使ったらいいじゃないですか。PRO-PREPは培養細胞専用というわけではなかろう。 https://intronbio.com:6001/inc/downfile.php?filename=F1524181530.pdf&orgfilename=IDR-RP0028_PRO-PREP.pdf&filedir=product_protocol

(無題) 削除/引用 No.12026-6 - 2023/12/21 (木) 18:24:37 - G25 ホモジナイズするのが常法でしょう。 市販のマイクロチューブ用のpestleが便利です。 例　https://axel.as-1.co.jp/asone/d/2-4478-02/ 間に合せには、ピペットチップの先をライターで熱してマクロチューブの底に押しつけて潰したものなんかが使えます。

(無題) 削除/引用 No.12026-5 - 2023/12/21 (木) 18:24:14 - おお お示ししたリンクにレシピがあるのだが、、、

(無題) 削除/引用 No.12026-4 - 2023/12/21 (木) 18:17:28 - ほーきんす 詳細にご説明いただきありがとうございました。 大変勉強になりました。 lysis bufferが研究室にないため、よく調べてから購入し使ってみようと思います。

(無題) 削除/引用 No.12026-3 - 2023/12/21 (木) 17:24:47 - おお 摘出して、細かく切り刻んで、lysis buffer (RIPA BUFFERとか)と混ぜて、homogenize するのが手っ取り早いやり方かと。または、組織染色の要領でクライオスタットで切片を作りlysis bufferで抽出する。 実験によっては細胞の純化をした方が望ましいならそう言うキットを使う手もあるだろうけど、おそらくプロテアーゼを使いだろうから分泌物などの評価ができないかもしれん。詳しくは文献やプロトコールを調査したらいいと思う。 homogenizeは色々あって、 Potter-Elvehjem Dounce homogenizer 上記と似た感じのすりガラスになっているもの ポリトロン ビートビーター など各種あって、どれも大抵は使えると思う。 てかプロトコールとか調べないの？ www.abcam.com/protocols/sample-preparation-for-western-blot#preparation-of-lysate-from-tissues www.ptglab.com/media/2724/protocols-for-web_lysate-preparation_v3.pdf 組織からタンパク抽出するのに特化したlysis bufferも売られてて、その試薬の説明書見ると方法が書いてあったりする。 www.thermofisher.com/order/catalog/product/78510

(無題) 削除/引用 No.12026-2 - 2023/12/21 (木) 17:18:42 - あ ウエスタンブロット位なら、エッペンドルフチューブに腫瘍サンプル少量とリシスバッファーを入れて<--こう言う形のプラ棒でグリグリすれば良いと思います。

マウスの組織から蛋白抽出する方法 削除/引用 No.12026-1 - 2023/12/21 (木) 14:23:46 - ほーきんす もしご存知の方がいらっしゃいましたらご教授願います。 マウスの腫瘍を摘出して蛋白抽出後ウエスタンブロットをしようと考えています。 vitroの接着細胞からはPRO-PREPを用いてみんなされているのですが、組織から蛋白抽出をしている方がおらず困っています。Tumor Dissociation Kitなどを用いるのでしょうか？ 基本的な質問で申し訳ございませんがよろしくお願いいたします。

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