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C2C12筋管細胞のタンパク質抽出について トピック削除
No.12131-TOPIC - 2024/02/03 (土) 18:20:26 - myc
C2C12筋管細胞のタンパク質抽出を行うにあたって、以下の点に困っております。アドバイスなどありましたら、ぜひ教えていただきたいです。

・C2C12細胞の分化3日目あたりで分化した細胞が密集して隙間が見えてくる。
・サンプル処理後(溶媒はメタノール、終濃度は0.01%以下)、4時間ほどで細胞が剥がれて隙間が目立つ。

実験の流れは次のとおりです。
C2C12細胞を60mm dishに 5×10^5 cells播種したあと、分化して4〜5日後(筋管の形成確認後)にサンプルを24時間処理(5mlに50μl)しています。サンプルは毒性のない濃度で調製しており、dishを揺らしながら添加しています。
 
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(無題) 削除/引用
No.12131-4 - 2024/02/06 (火) 01:04:51 - おお
なんやぁ。。。

(無題) 解決済み 削除/引用
No.12131-3 - 2024/02/05 (月) 19:29:12 - myc
濃度計算を間違えておりました。
調製しなおして添加したところ、解決しました。

(無題) 削除/引用
No.12131-2 - 2024/02/05 (月) 16:25:46 - qq
>サンプル処理後(溶媒はメタノール、終濃度は0.01%以下)
>サンプルを24時間処理(5mlに50μl)しています。
なんとなく濃度が一致しない感じです。

C2C12筋管細胞のタンパク質抽出について 削除/引用
No.12131-1 - 2024/02/03 (土) 18:20:26 - myc
C2C12筋管細胞のタンパク質抽出を行うにあたって、以下の点に困っております。アドバイスなどありましたら、ぜひ教えていただきたいです。

・C2C12細胞の分化3日目あたりで分化した細胞が密集して隙間が見えてくる。
・サンプル処理後(溶媒はメタノール、終濃度は0.01%以下)、4時間ほどで細胞が剥がれて隙間が目立つ。

実験の流れは次のとおりです。
C2C12細胞を60mm dishに 5×10^5 cells播種したあと、分化して4〜5日後(筋管の形成確認後)にサンプルを24時間処理(5mlに50μl)しています。サンプルは毒性のない濃度で調製しており、dishを揺らしながら添加しています。

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