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免疫染色のための組織の固定 トピック削除
No.12187-TOPIC - 2024/02/23 (金) 05:18:57 - tato
一つお教えいただきたいのですが、マウスの脳で凍結切片を作成し免疫染色を行う予定です。一般的には脳を取り出したのちにPFAで固定し、その後sucroseで置換しOCTに包埋しますが、事情により既に脳を半分に切ってなんの処理もせずに-80度に置いております。これを使って免疫染色をしたいのですが、その手順についてお伺いしたいです。今考えているのは凍結組織をOCTに包埋して切片を作成し、乾燥。その後固定する予定です。sucroseの置換ができないので組織にダメージが生じると思われますが、このような方法で免疫染色を行った方はおられますか?またその際の結果をお教えいただけますと助かります。
 
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No.12187-5 - 2024/02/24 (土) 23:47:22 - 774
新鮮(未固定)凍結切片ということではないの?
割とやられる方法だと思いますが。

(無題) 削除/引用
No.12187-4 - 2024/02/24 (土) 03:54:34 - おお
脳はわからんけど、組織をOCTを使わず急速凍結してー80保存したものをクライオで切ってめんせんするというのはあるにはあります。結構うまくいくようですけど。

(無題) 削除/引用
No.12187-3 - 2024/02/24 (土) 00:28:27 - tato
あのさん、

コメントありがとうございます。
今回は厳密には部位を特定する必要がないのでやってみます。
ありがとうございます。

>[Re:2] あのさんは書きました :
> 目的と脳の領域によると思いますが、やってみるしかないでしょうね。
>
> 厳密に脳内部位を限定する必要があるとかだと難しいかもしれないですが。

(無題) 削除/引用
No.12187-2 - 2024/02/23 (金) 17:26:49 - あの
目的と脳の領域によると思いますが、やってみるしかないでしょうね。

厳密に脳内部位を限定する必要があるとかだと難しいかもしれないですが。

免疫染色のための組織の固定 削除/引用
No.12187-1 - 2024/02/23 (金) 05:18:57 - tato
一つお教えいただきたいのですが、マウスの脳で凍結切片を作成し免疫染色を行う予定です。一般的には脳を取り出したのちにPFAで固定し、その後sucroseで置換しOCTに包埋しますが、事情により既に脳を半分に切ってなんの処理もせずに-80度に置いております。これを使って免疫染色をしたいのですが、その手順についてお伺いしたいです。今考えているのは凍結組織をOCTに包埋して切片を作成し、乾燥。その後固定する予定です。sucroseの置換ができないので組織にダメージが生じると思われますが、このような方法で免疫染色を行った方はおられますか?またその際の結果をお教えいただけますと助かります。

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