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血中グルコース濃度測定法について トピック削除
No.1272-TOPIC - 2012/12/20 (木) 10:58:25 - たた
現在、以下のようなごくオーソドックスな実験を行う予定です。

1)db/dbマウス(8〜10週齢)にグルコース負荷(経口投与)
2)設定した時間ごとに血液を尾静脈から採取
3)それぞれのサンプルの血中グルコース濃度を測定

血中グルコース濃度を測定する際、私の知る限り論文では、すべて血中簡易グルコース測定キット(メーカーは様々)を用いて測定しています。

そこでひとつ質問なのですが、血中グルコース濃度を簡易測定キットではなく、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)で絶対値(mg/dl)測定するという方法論は合理的なのでしょうか、またそもそも可能なのでしょうか。

ご教授頂けたら幸いです。
 
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(無題) 削除/引用
No.1272-7 - 2012/12/20 (木) 15:50:47 - ~
>HPLCでの測定が(技術的に)可能かどうかということです。
血中グルコース濃度をHPLCで測定することは技術的に可能です。
http://www.cord.edu/dept/chemistry/CCJAC/2011_Vol_2/2011_2_58.pdf

課題があるとすれば、
・サンプル量の確保
・不溶物の除去
 (微量だとフィルターろ過が困難です)
・(カラムまたは検出器による)フルクトースとの分離
あたりでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.1272-6 - 2012/12/20 (木) 13:13:22 - おお
www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/6725484
www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/3934205
www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/3998020
まあご自分で検索するとか、、、

上記のものは古いですけど、こういうものは古い方から見ていった方が方法を見つけやすいです。カラムのバリエーションも時代とともに増えるのでもう少し新しいところまで見ていった方がいい方法が見つかるかもしれません。

ご自分で樹立するとか、、、
考えることは、
検出方法(感度によって方法論がかわってきたりします)
夾雑物
分解能(特に糖類は異生体とか分けにくいものもありますので)

あるいはHPCL屋さんに問い合わしてみるか、彼らのデーターベースをみる。
国内であれば東そーとか、カラムを使用したデーターをいろいろ持っていてデーターベース化していると思います。
GE(ファルマシア)もデーターベースは可也蓄積していて持っていると思います。

(無題) 削除/引用
No.1272-5 - 2012/12/20 (木) 12:52:26 - み
>[Re:4] たたさんは書きました :

質問の趣旨はどちらが簡便かどうかではなく、HPLCでの測定が(技術的に)可能かどうかということです。またそのような検討を実際にしておられる方やそのような報告を見たことがある諸先生がおられましたら御教授下さい。
>

HPLCによる測定が可能かどうかはグルコースのピークが他の物質と明確に区別できるかどうかによるのでは?
また流路中での吸着ロスなどどのくらい問題になるのかなあ?と思った。

追加情報 削除/引用
No.1272-4 - 2012/12/20 (木) 12:02:28 - たた
追加情報ですが、HPLCで血中グルコース濃度を測定できたと仮定しても、測定キットのほうがはるかに簡便であることは十分承知しております。事実、論文では私の知る限り測定キットを用いているものしか見ないわけですので。

変な質問であり、恐縮です。諸般の理由によりこのような変な質問をした理由は伏せさせていただきますが、質問の趣旨はどちらが簡便かどうかではなく、HPLCでの測定が(技術的に)可能かどうかということです。またそのような検討を実際にしておられる方やそのような報告を見たことがある諸先生がおられましたら御教授下さい。

よろしくお願い申し上げます。

(無題) 削除/引用
No.1272-3 - 2012/12/20 (木) 11:49:28 - TS
血中グルコース濃度を簡易測定キットは、絶対定量だと思います。
「簡易」って表記されているのでしょうか。
そうだとしても、簡単にできる、の意であって、定量性が低いという意味ではないと思います。

HPLC流す方がはるかに手間で、定量性も特に変わらないと思うんですけど。

(無題) 削除/引用
No.1272-2 - 2012/12/20 (木) 11:41:44 - m&m
<http://skk>

血中グルコース濃度測定法について 削除/引用
No.1272-1 - 2012/12/20 (木) 10:58:25 - たた
現在、以下のようなごくオーソドックスな実験を行う予定です。

1)db/dbマウス(8〜10週齢)にグルコース負荷(経口投与)
2)設定した時間ごとに血液を尾静脈から採取
3)それぞれのサンプルの血中グルコース濃度を測定

血中グルコース濃度を測定する際、私の知る限り論文では、すべて血中簡易グルコース測定キット(メーカーは様々)を用いて測定しています。

そこでひとつ質問なのですが、血中グルコース濃度を簡易測定キットではなく、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)で絶対値(mg/dl)測定するという方法論は合理的なのでしょうか、またそもそも可能なのでしょうか。

ご教授頂けたら幸いです。

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