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(無題) 削除/引用 No.12760-7 - 2024/12/27 (金) 08:46:52 - ねずみ wash液の吸引で剥がれるのであれば、材質の問題で接着が極端に悪くなっているか吸引が強すぎるか（wellが小さいと一気に吸い上げてしまうとか）と思われますので、ピペットマンを使ってゆっくり液を吸い上げるとか、完全に吸い上げないで少し液を残してwashするとか（残液が気になるならwashの回数を増やす）、試してみてはどうでしょう？

(無題) 削除/引用 No.12760-6 - 2024/12/27 (金) 04:10:58 - LPS 3 wells dishってもしかして、細胞培養用でなくて、細菌用のアガーをひいて使うタイプのものじゃないですか。だとしたら接着は悪くなってしまうんじゃないでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.12760-5 - 2024/12/26 (木) 17:00:45 - う コーティングするか、パッセージの少ない細胞ロットでやった方がいい。 継代を繰り返すと剥がれやすくなるのですが、細胞バンクから貰ったばかりの細胞は驚くほど広がってくっついて顕微鏡観察しやすいですよ。

(無題) 削除/引用 No.12760-4 - 2024/12/26 (木) 16:21:06 - 774R 3welldishって、それだけで相手に伝わる一般的なものなのですか？私は初耳です。 HeLaは接着の強い細胞なので適切なコーティングをすれば簡単に剥がれて困ることはないです。

(無題) 削除/引用 No.12760-3 - 2024/12/26 (木) 15:35:46 - ぴえん 無血清培地でwashしましたが、細胞数の減少を確認しました。おそらく、washの液を吸う際の吸引によって細胞が剥がれているのだと考えられます。(アスピレーターで壁伝いに上清を吸うと細胞の大半がなくなるため) 優しく吸う以外対処はないのでしょうか。あと、これは3welldish特有なのですがこういった経験は入りますでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.12760-2 - 2024/12/26 (木) 12:31:59 - おお マグネシウム、カルシウム含有PBSを使ってなかったらそちらに変更するか、無血清培地でWashしてみればどうでしょうか。

細胞イメージング用3 well dishでの培養について 削除/引用 No.12760-1 - 2024/12/26 (木) 11:05:37 - ぴえん 試薬の節約のため、3well dishで細胞イメージングを行おうとしているのですが、wash→試薬入り培地添加で細胞がはがれていしまいます。glass bottom dishでは細胞ははがれませんでした。何か知見があれば助言いただきたいです。 以下に条件の詳細を記します。 細胞：HeLa 細胞 継代操作 → 3000 cells/wellで細胞を播き、16 hインキュベート (細胞の接着を確認) → D-PBSでwash → DMSO (0.25 %)含む無血清培地、血清培地を添加。 培地を添加後、細胞確認すると細胞の減少を確認。 おそらくwashのタイミングではがれていると考えられます。

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