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マウス骨髄におけるCD45&CD31ダブルポジティブ細胞 トピック削除
No.1363-TOPIC - 2013/01/21 (月) 12:51:08 - arashi
現在、マウス骨髄細胞をCD45抗体およびCD31抗体を用いて白血球系細胞と血管内皮細胞およびその他の細胞集団として検出し、それぞれの細胞集団をsortすることを試みています。
CD31-single-positiveの集団は血管内皮細胞、CD45-single-positiveの細胞集団を白血球系の細胞集団としているのですが、CD31とCD45ダブルポジティブの集団が約2-3割ほど認められます(ちなみに抗体染色前にFcブロッカーを使用しています)。
論文等でもCD31&CD45ダブルポジティブ細胞が掲載されていることがあるのですが、一般的にダブルポジティブ細胞は存在しないはずじゃないかなぁと思い、このフォーラムで質問をさせて頂いています。
このダブルポジティブ集団が一体何の細胞なのかお分かりになる方はいらっしゃいますか?
ご教授のほうよろしくお願い致します。
 
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解決しました。 解決済み 削除/引用
No.1363-6 - 2013/01/29 (火) 08:48:02 - arashi
貴重なご意見有り難うございました。

(無題) 削除/引用
No.1363-5 - 2013/01/22 (火) 18:56:06 - qq
>CD31とCD45ダブルポジティブの集団が約2-3割ほど認められます(ちなみに抗体染色前にFcブロッカーを使用しています)。

1)そこで、Fcブロッカーは期待通りにすべてブロックしていますか?
2)CD31のポジコンを適切にとられているのでしょうか?つまり、血管内皮細胞であれば当然のシグナルを見ているのでしょうか?抗体によって適切なカットオフがあるはずですが、CD45の方は、骨髄細胞を見ているので、結構なのでしょうが、CD31のシグナルを適切にコントロールしてますか?
3)質問のなかで「(ちなみに、。。。」とくると、カチーンとくる方なのですが、あなたはそうではないのでしょうね。

朗報は、
MACSのCD31を見ると、double-posがあっても結構とは出ています。保証になるかどうかは、わかりません。

おおさんに対する返答 削除/引用
No.1363-3 - 2013/01/22 (火) 12:24:35 - arashi
おおさんへ

誤解を与えてしまい申し訳ありません。
論文に掲載されているのに一般的ではないという様に表現してしまったことは論文を書かれている先生方に対して非常に失礼な表現でした。
一般的ではないという様に記載しているのは自分の理解の範疇の中でです。もちろん骨髄のようにヘテロな細胞集団の中にCD45&31ダブルポジティブの細胞がいる可能性は自分も考慮しております。
だからこそ、このフォーラムで質問をさせて頂いている次第です。

(無題) 削除/引用
No.1363-2 - 2013/01/22 (火) 07:42:57 - おお
>[Re:1] arashiさんは書きました :

> 論文等でもCD31&CD45ダブルポジティブ細胞が掲載されていることがあるのですが、一般的にダブルポジティブ細胞は存在しないはずじゃないかなぁと思い、このフォーラムで質問をさせて頂いています。

逆質問ですが一般的に存在しないって、存在しないとどうやって決めるのでしょうか?

マウス骨髄におけるCD45&CD31ダブルポジティブ細胞 削除/引用
No.1363-1 - 2013/01/21 (月) 12:51:08 - arashi
現在、マウス骨髄細胞をCD45抗体およびCD31抗体を用いて白血球系細胞と血管内皮細胞およびその他の細胞集団として検出し、それぞれの細胞集団をsortすることを試みています。
CD31-single-positiveの集団は血管内皮細胞、CD45-single-positiveの細胞集団を白血球系の細胞集団としているのですが、CD31とCD45ダブルポジティブの集団が約2-3割ほど認められます(ちなみに抗体染色前にFcブロッカーを使用しています)。
論文等でもCD31&CD45ダブルポジティブ細胞が掲載されていることがあるのですが、一般的にダブルポジティブ細胞は存在しないはずじゃないかなぁと思い、このフォーラムで質問をさせて頂いています。
このダブルポジティブ集団が一体何の細胞なのかお分かりになる方はいらっしゃいますか?
ご教授のほうよろしくお願い致します。

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