Bio Technical フォーラム

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アグロバクテリウム トピック削除
No.140-TOPIC - 2012/02/10 (金) 00:50:03 - みな
はじめまして。
いつも勉強させていただいています。

私は大学院生で植物の遺伝子組換の研究を
始めようとしているのですが、
そのために必要なアグロバクテリウムのコンピテントセルを販売している
試薬会社をご存知の方がいらっしゃいましたら教えていただけませんか。

研究室で植物の組換をやるのは初めてなので良くわかりません。
よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.140-4 - 2012/02/18 (土) 01:23:13 - かしの木
市販のアグロバクテリウムのコンピテントセルは、
私の知る限りLBA4404株しかありませんが、
この株は全ての植物の形質転換に適しているわけではありません。

「みな」さんが使われる植物で既に形質転換の前例があるのでしたら
うまくいっている菌株を分けてもらうのがよいでしょう。
もし前例が無いようでしたら様々な菌株を入手して
効率の良いものを探す必要がでてくると思います。

アグロバクテリウムの形質転換はエレクトロポレーションか、
設備がなければ凍結融解法でも可能です。
いずれも簡単ですよ。

(無題) 削除/引用
No.140-3 - 2012/02/14 (火) 19:11:45 - tany
エレクトロポレーション用のコンピテントセルなら簡単に作れますよ.

アグロを培養して,滅菌グリセロールでよくリンスするだけです.
(この時,塩が残っていると,パルスの際に小爆発して導入効率もかなり下がるらしいです.)
詳細なプロトコルはいろんなところに記載があるので調べてみるとよいと思います.

(無題) 削除/引用
No.140-2 - 2012/02/10 (金) 14:12:17 - ~
http://catalog.takara-bio.co.jp/product/basic_info.asp?unitid=U100006216
http://www.invitrogen.jp/catalogue/gibco/18313-015_001.shtml
希望のものと同じかは分かりませんが。

ただ、アグロバクテリウムのコンピテントセルを自作しているラボも多いようですね。
金で時間を買うかどうかは一度ボスに確認した方がいいのではないでしょうか。

また、位置から系を立ち上げるのであれば、系を持っているラボに教わりに行く方法もあります。
いい実験書や資料があれば自分で立ち上げるのもいいのですが、コンピタントセルの販売元も分からないのであれば、一通りを教えてくれるラボを探したほうがいいのではないでしょうか。

アグロバクテリウム 削除/引用
No.140-1 - 2012/02/10 (金) 00:50:03 - みな
はじめまして。
いつも勉強させていただいています。

私は大学院生で植物の遺伝子組換の研究を
始めようとしているのですが、
そのために必要なアグロバクテリウムのコンピテントセルを販売している
試薬会社をご存知の方がいらっしゃいましたら教えていただけませんか。

研究室で植物の組換をやるのは初めてなので良くわかりません。
よろしくお願いします。

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