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(無題) 削除/引用 No.1402-5 - 2013/02/01 (金) 11:52:47 - ナノ 詳しく説明してくださってとても分かりやすいです。 ありがとうございました。 さっそく抗体ラベルを始めたいと思います。 またよろしくお願いいたします。

(無題) 削除/引用 No.1402-4 - 2013/02/01 (金) 11:32:47 - ~ 理解するには絵を描いてみるのが早いと思いますが。 適当に大きめの四角（カラム）を描いて、 そこに ○HRP非標識抗体 ●HRP標識抗体 ・HRP を流します。 最初に混合物を流すステップ： カラムは抗体に結合するので、○と●がくっつきます。 ・は洗浄により流れていきます。 カラムとの結合は親和力によるものであり、微量な○や●も流れていきます。 洗浄ステップ： ○と●は基本的には結合したままですが、微量にははがれて漏れていきます。 残っている・は流れていきます。 回収ステップ： そもそも・はほとんどありません。 ○と●が流れていきます。 流し方やその後の精製工程によっては、○と●を分けることができるかもしれません。

(無題) 削除/引用 No.1402-3 - 2013/02/01 (金) 09:44:16 - ナノ さっそく教えてくださってありがとうございました。 もう一つ教えていただきたいですが、 抗体をカラムに吸着させて、非吸着成分の未反応HRP等を洗浄すると、protein Aには標識できた抗体とそのままの抗体の両方が吸着して、 溶出液にも両方が入っていると考えたら良いでしょうか？ 宜しくお願いいたします。

(無題) 削除/引用 No.1402-2 - 2013/01/31 (木) 19:06:34 - KEN HRPとか難しく考えず、単純にProtein A/Gで抗体を精製したと考えればわかりやすいのでは？ 抗体をカラムに吸着させて、非吸着成分の未反応HRP等を洗浄し、溶出バッファーできれいになった抗体だけを溶出というわけですが。。。

HRP標識未標識分離 削除/引用 No.1402-1 - 2013/01/31 (木) 18:45:39 - ナノ HRP標識IgG抗体と未標識のHRPを固相化Protein AまたはGカラムで分離する原理を教えてください。 宜しくお願いいたします。

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