Bio Technical フォーラム

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BCA protein assay トピック削除
No.1470-TOPIC - 2013/02/21 (木) 09:26:38 - おお
BCA protein assayなのですが、サンプルと混ぜた時の発色の立ち上がりとスタンダードをサンプルと同じバッファーで調製したものの発色の立ち上がりを比べるとどうもサンプルの発色の立ち上がりがはやいようなきがします。

皆さんのご経験ではどうでしょうか。
またこのことに関してアドバイスがありましたら教えていただければさいわいです。
 
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No.1470-5 - 2013/02/27 (水) 03:50:22 - qうぇrちゅいおp@
BCA法って銅の還元とか利用してるだろ。細胞内はもともと還元的で、還元型グルタチオンとかシステインとかアスコルビン酸とかがあるからかなあ。アルブミンの場合レドックスアクチィブなシステイン残基って1つか2つくらいだろたしか。蛋白質定量って相対的な見方だし、こういう条件のもとで測ったらこうでしたみたいな感じでいいじゃね。

(無題) 削除/引用
No.1470-4 - 2013/02/21 (木) 14:47:01 - おお
ありがとうございます。そっかそういうこともかんがえられますよね。リンクいま手が空いてないのであとで確認いたします。

(無題) 削除/引用
No.1470-3 - 2013/02/21 (木) 10:28:16 - 通りすがり
確かに経験上サンプルの方が立ちあがりが速い気がします。
主に動物組織のホモジネートです。

ttp://www.thermoscientific.jp/bid/support/mag/201002-p/technology.html

改めて原理を確認すると、反応しやすいタンパクとかありますね。
高次構造なんかも関係するのかな

(無題) 削除/引用
No.1470-2 - 2013/02/21 (木) 09:27:46 - おお
サンプルはマンマルの細胞からのライセートがたいていです。

BCA protein assay 削除/引用
No.1470-1 - 2013/02/21 (木) 09:26:38 - おお
BCA protein assayなのですが、サンプルと混ぜた時の発色の立ち上がりとスタンダードをサンプルと同じバッファーで調製したものの発色の立ち上がりを比べるとどうもサンプルの発色の立ち上がりがはやいようなきがします。

皆さんのご経験ではどうでしょうか。
またこのことに関してアドバイスがありましたら教えていただければさいわいです。

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