Bio Technical フォーラム

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プロテアソーム活性 トピック削除
No.1582-TOPIC - 2013/03/26 (火) 03:04:27 - pr
お聞きしたいことが3つあります。
すべての質問でなく3つの質問のうち1つでもよいので、答えていただけると大変嬉しいです。

一つ目:文献などでよく20SプロテアソームをSDSで活性化するといったことを見ます。
どのようなメカニズムで活性化されるのか教えてください

二つ目:26SプロテアソームはSDSを加えなくても活性を持つのでしょうか。

三つ目:細胞内では20Sプロテアソームと26Sプロテアソームは両方存在するのでしょうか。
するのならその割合はどのくらいでしょうか。
また26Sプロテアソームだけを回収するといったことはできるのでしょうか。


大変素人な質問で恐縮ですが、教えてください。
 
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(無題) 削除/引用
No.1582-5 - 2013/03/29 (金) 10:41:23 - ~
三つ目
は26Sプロテアソームの精製法自体についての論文や、精製26Sプロテアソームを用いて実験している論文は複数ありますが、それらの報告からは26Sだけを回収できるとは言えないのですか?

論文の方法では26S"だけ"を回収できてないと判断しているのか、単にそれらの論文を読んでいないから回収の可否を知らないのかが分かりません。

(無題) 削除/引用
No.1582-4 - 2013/03/29 (金) 02:01:48 - おお
Repeated freeze-thaw cycles of pu-
rified CP promote the unrepressed conformation [un-
published observations]. Mild chemical treatments, such
as exposure to low ionic strength or to levels of sodium
dodecylsulfate (SDS) are effective as well. Low ionic
strength of solution, small hydrophobic peptides, min-
utes amount of detergents or specific mutations in chan-
nel gating residues can enhance peptide hydrolysis by
free-standing 20S CP [9, 15, 22, 31, 32, 34]. It is pre-
sumed that all these treatments promote disordering in
channel blocking residues, thus facilitating substrate en-
try. Under physiological conditions, however, it appears
that the greater part of free core particles are found nat-
urally in the closed state.

http://download.springer.com/static/pdf/731/art%253A10.1007%252Fs00018-004-4131-y.pdf?auth66=1365536657_234757537b9c1c93f03a4e518da19f84&ext=.pdf
K
eepers at the final gates: regulatory complexes and gating
of the proteasome channel
M. Bajorek and M. H. Glickman *

CMLS, Cell. Mol. Life Sci. 61 (2004) 1579 – 1588
1420-682X/04/131579-10
DOI 10.1007/s00018-004-4131-y
© Birkhäuser Verlag, Basel, 200

よまなかったの?

(無題) 削除/引用
No.1582-3 - 2013/03/28 (木) 20:55:42 - pr
困っておりますので、どの質問に対してでも良いのでどなたかご教授お願いいたします。

(無題) 削除/引用
No.1582-2 - 2013/03/26 (火) 04:56:36 - おお
ttp://download.springer.com/static/pdf/731/art%253A10.1007%252Fs00018-004-4131-y.pdf?auth66=1365536657_234757537b9c1c93f03a4e518da19f84&ext=.pdf

ttp://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0959440X03001635

どの様な方かわかりませんので、適切なアドバイスでないかもしれませんが、一度レビューなど読まれてはどうでしょうか。日本語の雑誌でもけっこう取り上げられているのではないでしょうか?

プロテアソーム活性 削除/引用
No.1582-1 - 2013/03/26 (火) 03:04:27 - pr
お聞きしたいことが3つあります。
すべての質問でなく3つの質問のうち1つでもよいので、答えていただけると大変嬉しいです。

一つ目:文献などでよく20SプロテアソームをSDSで活性化するといったことを見ます。
どのようなメカニズムで活性化されるのか教えてください

二つ目:26SプロテアソームはSDSを加えなくても活性を持つのでしょうか。

三つ目:細胞内では20Sプロテアソームと26Sプロテアソームは両方存在するのでしょうか。
するのならその割合はどのくらいでしょうか。
また26Sプロテアソームだけを回収するといったことはできるのでしょうか。


大変素人な質問で恐縮ですが、教えてください。

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