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(無題) 削除/引用 No.1687-4 - 2013/04/28 (日) 22:39:49 - 中年 エマルジョンになったときの水相と有機相の接触表面積が大きくなるように１：１にしているのだろうと思っていました。

(無題) 削除/引用 No.1687-3 - 2013/04/28 (日) 17:16:19 - おお >[Re:2] おおさんは書きました : > 有機層をふやすと、水層の回収率が下がりませんか? あ、そんなことはないですね、水層の容量を'減らさなければ、、、しつれいしました。

(無題) 削除/引用 No.1687-2 - 2013/04/28 (日) 17:13:18 - おお 有機層をふやすと、水層の回収率が下がりませんか? 私は精製された核酸の酵素処理などのあとにフェのクロの必要がある場合は有機層をへらしてます。先細りしているエッペンではそれのほうが水層のロス(取残し)が減りますから。

フェノクロto 削除/引用 No.1687-1 - 2013/04/28 (日) 16:42:07 - フェノクロ いつも大変お世話になっております。 これまで、DNA抽出時に何回もフェノール抽出やフェノクロ抽出をしましたが、恥ずかしながら、いつも何も考えずに水性溶液と等量加えて遠心、上清をとっていました。 少なすぎると、蛋白や脂溶成分の除去の低下を招き、多すぎるとDNAのフェノール層への移行を招くと思いますが、混入する脂溶成分や蛋白の量はクルードなサンプルと、精製後の酵素反応後のサンプルではだいぶ異なるし、DNA量もまちまちです。しかし私はいつも必ずフェノールやフェノクロはDNA溶液と等量で入れようとして、不純物が多い場合は抽出回数を増やすことで除去してきました。とは言え,中には間違えて1:2位になったこともありますが、サザンブロットで問題が起きたことはありませんでした。 何故、どのサンプルでも等量のフェノールを加え、サンプルの濃度や純度に応じてフェノクロ３に水性溶液１やその逆を行うことは無いのか、ご教示ください。

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