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Re:ATPase染色 削除/引用 No.189-2 - 2012/02/27 (月) 10:47:56 - GLUT4 アルカリ処理をpH10.3のみでやられていますが、もう少し幅をもって検討された方が良いかと思います。 私はラットですが10.6-7くらいでやってました。

ATPase染色 削除/引用 No.189-1 - 2012/02/21 (火) 22:23:02 - 染色初心者 今日初めてATPase染色を行いました 手順としては、 4%ホルマリン固定液に4℃2分 pH10.3アルカリ処理液室温(4.8mM CAPS、600mM 塩化カリウム、185mM 塩化カルシウム)15分 １%塩化カルシウム溶液で洗浄 ATP活性溶液(100mM 2-ｱﾐﾉｰ2-ﾒﾁﾙｰ1-ﾌﾟﾛﾊﾟﾉｰﾙ、200mM塩化カリウム、5.5mM塩化カルシウム、8mMATP、pH9.4)37度で30分 DWで洗浄 2%塩化コバルト溶液で2分 DWで洗浄 1%硫化アンモニウム1分 DWで洗浄後 50%エタノール、70%エタノール、90%エタノール、各1分 100%エタノール5分 キシレン1分後に封入しました。 使用した試料はマウスの腓腹筋ですが、全ての細胞が茶色く染まり違いは見てとれません。何がいけないのでしょうか？方法は色々あると思いますが、上で使用しているような溶液を使用して染色できる方法があればご教示ください。 よろしくお願い致します。

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