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ウエスタンにおけるケミルミ（ECL）の希釈 トピック削除
No.194-TOPIC - 2012/02/23 (木) 11:26:30 - maa
現在私はウエスタンブロッティングを用いた研究を行っています。
皆さんにお伺いしたいのですが、ケミルミ（ECL）を希釈して用いた経験をお持ちの方はいらっしゃらないでしょうか？
といいますのも、ケミルミは非常に高価なので使用量を最小限にしたいですが、減らしすぎるとムラの原因となりますし、希釈して、暴露時間の延長によりムラなくケミルミが行えるのであればぜひそう言った方法をとってみたいと思っているからです。今は研究がストップしているので自分では試していないのですが、やってみた方やその際の方法など、何かアドバイスがあればお願いいたします。
　
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(無題) 削除/引用
No.194-10 - 2012/04/03 (火) 03:30:23 - without
＞こういう公開の掲示板にはあんまり詳細は書かない方がいいかも
しれないですね。。。

個人的にはあまり気にしなくていいのではと思います。
うしろ、そういう情報を交換できるのがこういう掲示板の良いところではないでしょうか。

ご指摘　ありがとうございます 削除/引用
No.194-9 - 2012/03/28 (水) 17:52:21 - おじさん
＞こういう公開の掲示板にはあんまり詳細は書かない方がいいかも
しれないですね。。。

確かにそうですね．配慮が足りませんでした．もうちょっと誤魔化すべきでした．ご指摘　ありがとうございました．

(無題) 削除/引用
No.194-8 - 2012/03/25 (日) 00:04:31 - 中年
"homemade ECL"でGoogle検索すると一杯出てきますよ。

(無題) 削除/引用
No.194-7 - 2012/03/24 (土) 13:17:26 - ケ
便乗すみません。自作の方法を教えてください。

ありがとうございます 削除/引用
No.194-6 - 2012/03/23 (金) 06:45:21 - maa
皆様貴重なご意見をありがとう御座いました。

ケミルミ様のご意見を参考に自作を試みた所、使用量と価格のバランスが取れそうだということで話が落ち着きました。
kodamataro様、おじさん様、月詠様にも大変感謝しております。
また宜しくお願いいたします。

それくらい… 削除/引用
No.194-5 - 2012/03/23 (金) 02:26:32 - 月詠
ご自分で試してみればいいではないですか。。。

たとえば、適当な標準タンパクの濃度希釈系列のブロットを４枚くらいつくって、
ＥＣＬの@原液、A２倍希釈液、B４倍希釈液、C８倍希釈液で反応させて、
検出感度がどの程度変わるのか比較してみればいいだけですよね？

でも、、２倍希釈の裏技プロトコールが知れ渡ってしまったら、
メーカーの売り上げが（単純に）半減してしまいそうですので、
こういう公開の掲示板にはあんまり詳細は書かない方がいいかも
しれないですね。。。
　

(無題) 削除/引用
No.194-4 - 2012/03/22 (木) 20:12:55 - おじさん
ECL（低感度のもの）なら、１液と２液を等量混合してから、水で２倍くらいに希釈して使ったことあります．検出は問題なし．大腸菌で大量に発現させたタンパク質だったから問題なかったのかも知れません．高感度試薬ではやったことありません（量が少ないものを検出するための高感度試薬を希釈するのはどうかと思い．．．）．

(無題) 削除/引用
No.194-3 - 2012/02/24 (金) 01:17:26 - ケミルミ
自作どうよ。

(無題) 削除/引用
No.194-2 - 2012/02/23 (木) 11:48:17 - kodamataro
高すぎるとおっしゃいますが、よろしければメーカーと型番を教えていただけますでしょうか。

安価なものも出ていますよ。

ウエスタンにおけるケミルミ（ECL）の希釈 削除/引用
No.194-1 - 2012/02/23 (木) 11:26:30 - maa
現在私はウエスタンブロッティングを用いた研究を行っています。
皆さんにお伺いしたいのですが、ケミルミ（ECL）を希釈して用いた経験をお持ちの方はいらっしゃらないでしょうか？
といいますのも、ケミルミは非常に高価なので使用量を最小限にしたいですが、減らしすぎるとムラの原因となりますし、希釈して、暴露時間の延長によりムラなくケミルミが行えるのであればぜひそう言った方法をとってみたいと思っているからです。今は研究がストップしているので自分では試していないのですが、やってみた方やその際の方法など、何かアドバイスがあればお願いいたします。
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