いつも大変お世話になっております。
基本的なことですが、皆様の知恵をお貸しください。
私は24well プレートにまいたNIH3T3細胞において、ATP assayによりその細胞生存率を測定しております。
しかしながらwellからのサンプリングの際、細胞をすべてとりきることができずに(サンプリング後のdishを見てみると、wellの底に接着した細胞が残っているように見える)結果として、測定値がばらついてしまいます。
どのようにすれば正確にサンプリングすることができるでしょうか。
私が行っているプロトコールは以下の通りです。
150μL/wellのATP assay solusionをウェルにそそぐ。
↓
遮光下で10分間振盪
↓
ピペッティングにより細胞をはがす(各ウェルについて激しく1分間ピペッティング)
↓
100μLを別の白色96wellプレートに移す
↓
蛍光を測定
以上です。
どうかよろしくお願いします。 |
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