いつもフォーラム参考にさせてもらっています。
培養細胞からのRNA抽出(PCR用)のため、培地を除去後にPBSで洗浄、その後にlysisバッファーを添加しています。
その際のPBSですが、反応を止める意味で4度に冷やしたPBSを使用するように教わりました。それはそれで理解できるのですが、一方で細胞にとってはこれまで37度の環境にあったところを4度の状態になるのはストレスであり、遺伝子がその影響で動いてしまいノイズになるのでは?(むしろ37度のPBSが良い?)とも思っております。
みなさま、どのようにされておりますでしょうか?
ご教授いただければと思います。 |
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