Bio Technical フォーラム

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アクチンをIP トピック削除
No.2035-TOPIC - 2013/05/28 (火) 14:03:47 - パルティータ
アクチンと直接的あるいは間接的に相互作用していると考えられる分子をIPすることによって、証明したいと考えています。もし、アクチンとの結合をIPで解析されたことのある方がいらっしゃいましたら、いろいろとご教授願いたいと思います。特にこれが技術的に可能であるかをお聞きしたいです。

よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.2035-3 - 2013/05/28 (火) 16:13:04 - おお
http://www.nature.com/onc/journal/v29/n7/full/onc2009444a.html

アクチンはおおすぎるから、足場にしている蛋白でIPしてあくちんを検出する方がいいんじゃない?

あとはF-actin pull down assayとかいうのがあるようだけど。

Co-IPサンプル調製 削除/引用
No.2035-2 - 2013/05/28 (火) 15:57:50 - パルティータ
Co-IPをおこなうことにより、アクチンが足場タンパク質として働いていることを証明したく、検討しているのですが、細胞分画キットでおこなうと、アクチンが含まれる画分はSDSを含む溶液で溶解し、Co-IPサンプル調製には適しませんでした。
ほかの方法を検討しているのですが、こういった実験を行ったことがある方、もしくはやろうしてしている方、連絡をいただけると幸いです。

アクチンをIP 削除/引用
No.2035-1 - 2013/05/28 (火) 14:03:47 - パルティータ
アクチンと直接的あるいは間接的に相互作用していると考えられる分子をIPすることによって、証明したいと考えています。もし、アクチンとの結合をIPで解析されたことのある方がいらっしゃいましたら、いろいろとご教授願いたいと思います。特にこれが技術的に可能であるかをお聞きしたいです。

よろしくお願いします。

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