Bio Technical フォーラム

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プラスミドを抜く方法 トピック削除
No.2085-TOPIC - 2013/06/11 (火) 15:55:59 - ほんじゃ
現在大学で研究をしています。ESBLという耐性菌に関しての研究です。そこで質問です。ESBLはプラスミドを介して伝搬するといわれています。肺炎桿菌のESBLを使った実験でそのプラスミドを抜いた菌で実験しようと考えています。プラスミドを入れる方法はいくつかありますが抜いた菌を作成する方法があまりなく困惑しております。
御存じの方よろしければご教授お願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.2085-4 - 2013/06/11 (火) 18:02:38 - ポスドクj
スペシフィックな情報が要るなら、ESBLとか、例えばKlebsiella pneumoniaeとかをキーワードに加えてググってみるとよいです。
この菌でESBLをcuringした例がすぐ見つかります。実験条件の参考になると思います。
前例がいろいろあるようなので、実験に支障がないならお願いして除去済みの株をもらっちゃうか、条件とか難易度とか直接聞いてみるのもいいと思います。

いろいろありがとうございます。 削除/引用
No.2085-3 - 2013/06/11 (火) 16:51:04 - ほんじゃ
抜く方法は色々あるんですね。
実はPIPCなどの抗菌薬でプレッシャーを与えた培地やヒートショックなどをしても菌からプラスミドが抜けませんでした。
実験としてはESBL菌株とそれかあESBLのプラスミドを抜いた菌株の感染実験などを行う予定です。

(無題) 削除/引用
No.2085-2 - 2013/06/11 (火) 16:39:24 - ポスドクJ
plasmid curing protocolなどで検索すると情報がありますよ。エチブロやアクリジンオレンジを培地に混ぜたり、他に高温で培養とかエレクトロポレーションとかもありました。ストレスをかけて、プラスミドの有無で選択がかかりやすくするのだと思います。
大腸菌のF因子のように、プラスミドにtoxinとantitoxinが載っていてプラスミドが除かれた細胞を殺すようになってる場合は、toxinを除いたプラスミドを作っておいて先に入れ替えるといいかもしれないです。

プラスミドを抜く方法 削除/引用
No.2085-1 - 2013/06/11 (火) 15:55:59 - ほんじゃ
現在大学で研究をしています。ESBLという耐性菌に関しての研究です。そこで質問です。ESBLはプラスミドを介して伝搬するといわれています。肺炎桿菌のESBLを使った実験でそのプラスミドを抜いた菌で実験しようと考えています。プラスミドを入れる方法はいくつかありますが抜いた菌を作成する方法があまりなく困惑しております。
御存じの方よろしければご教授お願いいたします。

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