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(無題) 削除/引用 No.2104-7 - 2013/06/17 (月) 18:07:55 - おお もしトランスフェクションしたあと、プラスミドをもっていない細胞が必要ならネガティブセレクションというてもありますけど。

(無題) 削除/引用 No.2104-6 - 2013/06/17 (月) 11:11:22 - Q 一般的にトランスフェクション48hr後に解析することが多い それがみんなピークだと思っているから。 根拠はわかんない。 ＞細胞種やプラスミドの種類にこだわらず、一般的な知識で結構です。 一般的な回答って、有り得ないでしょ？ はっきり言って、自分のも含めてここに来る回答は 参考になるものなんて出てこないと思いますが。

(無題) 削除/引用 No.2104-5 - 2013/06/17 (月) 09:19:32 - NF ご助言ありがとうございます。 ”プラスミド”がなくなるという点につきましては、独り言さまのご助言のように入ったコピー数と分裂回数から想定するしか方法はないようですね。 ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.2104-4 - 2013/06/15 (土) 19:21:27 - 名無し 経験的には、70~80%くらいのコンフレンシーでトランスフェクションして、それから36~48時間後くらいで発現ピーク迎えることが多い気がしている。もちろんベクター、トランスフェクションの方法や効率、発現させた蛋白質のターンオーバーレイト、細胞の種類などで左右される。なので結局は自分で確認するしかないとおもう。

(無題) 削除/引用 No.2104-3 - 2013/06/15 (土) 14:42:47 - おお COSのシステムで48から96時間の間で高発現が期待できるというような、記述をプロとコールの説明で読んだことがあります。

(無題) 削除/引用 No.2104-2 - 2013/06/14 (金) 20:38:20 - 独り言 消えると言われると、どのくらいかかるかわからないでござる。 一般的には、4-5日ぐらいしたら、発現が減少し始める。細胞の増殖が早いともっと早いかも。 単純に考えると、３日目がピークとして、一日２倍に増殖する細胞で、常に均等にプラスミドが子孫細胞に伝わり、プラスミドの分解を無視すると、その７日後には１００倍以下の発現になっていると考えられるわぁ。何コピーのプラスミドがトランスフェクションされたかわかれば、いつ消えるのかわかるかもねぇ。

一過性発現でのプラスミドの保持期間 削除/引用 No.2104-1 - 2013/06/14 (金) 19:44:23 - NF いつも参考にさせてもらってます。 例えば、一過性のタンパク質発現のためにプラスミドを細胞にトランスフェクションした場合、細胞内にトランスフェクションされたプラスミドはどれくらいで消えてしまうのかご存知でしょうか？ 細胞種やプラスミドの種類にこだわらず、一般的な知識で結構です。 ご存知の方がおりましたら、ご教授いただければ幸いです。 よろしくお願いします。

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