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訂正 削除/引用 No.2168-5 - 2013/07/04 (木) 21:52:25 - DNA検量線 すいません 一部、質問をコピペしたんです。途中まで別の試薬で 問い合わせしていたんんで そのひな形を使用させていただきました 混乱させてすいません ご指摘ありがとうございます

(無題) 削除/引用 No.2168-4 - 2013/07/04 (木) 21:47:31 - 小言幸兵衛 ところで御社ってどこのこと？

なるほど 削除/引用 No.2168-3 - 2013/07/04 (木) 20:22:42 - DNA検量線 オオ様 ご丁寧に説明ありがとうございます 勉強不足であることを痛感しました 御礼まで

(無題) 削除/引用 No.2168-2 - 2013/07/04 (木) 17:01:12 - おお >[Re:1] DNA検量線さんは書きました : > > それとも、塩基あたりにどれだけインターカレーター剤を入れるか > 計算でだして、それぞれの希釈系列に加えていき > 検量線を作製するのでしょうか？ そんな実験はみたことないです。 えちぶろはDNAに結合しているときとしてないときで蛍光強度に大きな差がでるので、それでそくていするのです。 まあ大過剰でなくても、たとえばえちぶろがn分子あって、DNAフリーのえちぶろの蛍光強度aとして、DNAけつごうえちぶろの蛍光強度をbとして, x分子がDNA に結合しているなら、けんしゅつされる蛍光強度はyは y=a*(n-x)+bx y=(b-a)x+an 一定量のえちぶろが入っていたら直線の関係になるじゃないですか。 検量線にいれるえちぶろを変えないという理論だと測定するサンプルにどれだけえちぶろをいれないといけないかわからないじゃないですか? 検量線はDNA量0をとっておいて、それを検量せんの0としてプロットするか、DNAが0の時の値をバックグランドとして、すべての実測値からそれを差し引いて測定値とするか、好みの問題です。どちらでもいいです。

ＤＮＡの検量線の引き方 削除/引用 No.2168-1 - 2013/07/04 (木) 16:39:44 - DNA検量線 すいません、先日、似た質問をしたのですが　 最近、勉強していて、疑問点が出てきましたので どちらが正しいのか判断できなくて困っています お世話になっております 御社のエチブロやＹＯＹＯ−１などのデータ を見ますと、多少なりとも ＤＮＡがなくとも蛍光があるように思われます ＤＮＡの定量を行う際に 検量線を引くわけですが このとき、自家蛍光を考慮するとなると (1)ＤＮＡの希釈系列を準備 (2)最大ＤＮＡ量のときに十分に結合するであろうインターカレーター剤を加える （３）最大のインターカレーター剤が溶けている溶液をバックグラウンド溶液にしてこれの蛍光をそれぞれの希釈系列のサンプルの蛍光分から差し引く ことで検量線を作製するのでしょうか？ それとも、塩基あたりにどれだけインターカレーター剤を入れるか 計算でだして、それぞれの希釈系列に加えていき 検量線を作製するのでしょうか？ どなたか、教えていただければ幸いです

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