Bio Technical フォーラム

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同調剤の処理方法について トピック削除
No.2211-TOPIC - 2013/07/19 (金) 08:37:35 - ヨッキー
ド素人の者です。
NIH3T3をアフィディコリンで同調しようと考えているのですが処理方法が分からなくて困っています。
調べてもなかなか出てこなくて…
知っている人がいたら教えてください。
培地はDMEM(FBS5%)を使っています。

よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.2211-7 - 2013/07/19 (金) 18:17:59 - qq
>24時間アフィディコリンで同調させて
同調ってどういう意味でいってんの?
あなたは、24時間アフィディコリンを添加して、細胞をどうしたいのでしょうか??
そうすると、同調出来たこととは、「細胞をどうにかしたこと」なのだから、細胞をどうにかしたことを確かめると良いわけですよね。
細胞をどうしたことを確かめたいのでしょう?具体的な方法については返答もありそうですよ。
それにしても、何でド素人と自分で名乗る人が、毒物ばかり使いたがるかねえ?
それとも入試問題なのかい?

(無題) 削除/引用
No.2211-6 - 2013/07/19 (金) 18:07:27 - ヨッキー
すいません、調べてて知りたいことがあるのですが…
24時間アフィディコリンで同調させてその後どうやって同調出来たことを確かめればいいですか?
フローサイトメーターというのもないのでどうしたらいいか分かりません。
教えてください、お願いします。

(無題) 解決済み 削除/引用
No.2211-5 - 2013/07/19 (金) 12:23:23 - ヨッキー
分かりました、ありがとうございます。

(無題) 削除/引用
No.2211-4 - 2013/07/19 (金) 09:56:50 - おお
pubmedなどを使ってまず論文を探す訓練からはじめた方がよさそうです。。。

注意事項 削除/引用
No.2211-3 - 2013/07/19 (金) 09:17:15 - mon
初心者に注意事項...
論文等で同じ名前の細胞株や同じ名前の試薬を使っているかといって、自分で使っているもので成功しない時が割と有ります。細胞培養だと血清のlotは異なるでしょうし、いままでの蓄積した培養条件等で全く同じ細胞とはいえないので。
同じ名前の試薬でも、lotやメーカーにより精製度が異なったり、使用時にStockを作るときに何に溶解させるかでも影響がでることが有ります。
つまり、あくまでも参考データだと言うこと。この場合、同調が成功しているかどうか「自分の実験系」で必ず確かめてください。
なおNIH3T3はがん化しやすい細胞です。focusを作るようならがん化した細胞が混ざっていますので注意。

(無題) 削除/引用
No.2211-2 - 2013/07/19 (金) 09:07:32 - mon
なぜ検索出来ない?
"aphidicolin synchronization"でググればいろいろ出てきましたよ。
例えば、http://lanctotlab.org/en/protcellbio_synchr.html
この辺の記述をいくつか読んで、使用法の概略等をつかんで、
"aphidicolin synchronization NIH3T3"でググれば
http://www.molbiolcell.org/content/11/8/2821.full

同調剤の処理方法について 削除/引用
No.2211-1 - 2013/07/19 (金) 08:37:35 - ヨッキー
ド素人の者です。
NIH3T3をアフィディコリンで同調しようと考えているのですが処理方法が分からなくて困っています。
調べてもなかなか出てこなくて…
知っている人がいたら教えてください。
培地はDMEM(FBS5%)を使っています。

よろしくお願いします。

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