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(無題) 削除/引用 No.2553-5 - 2013/11/14 (木) 19:26:02 - AA 文面からの印象は「研究室に配属されたばかりの学部生」といったところでしょうか。 まずはよく先生と相談していただきたいとは思いますが。。。 酵素というのは触媒として化学反応を促進するタンパク質です。 また酵素によって反応を触媒される物質を基質と呼びますが、 酵素ごとに基質とする物質は異なります。（基質特異性と言います） したがって、どのような反応を触媒する酵素なのかによって、 陽性対照となるものも変わってきます。 質問者さんはNanodropを用いて酵素反応を調べていますが、 Nanodropは分光光度計という、検体の光の吸収を計測する機械の一種です。 溶液中の特定の物質の濃度は、その溶液が特定の波長の光をどの程度 吸収するかで推定することができます。({吸光度係数}などで調べて下さい) したがって単位時間あたりに生産される酵素反応の反応産物の量を 計測することで、酵素活性を推測しています。 (あるいは反応の副産物を別の酵素反応に利用する場合もあります) したがって、用意したという基質が何なのかわかりませんと、 陽性対照に何を於けば良いかもわかりません。 とりあえず酵素自体がなんなのか、細胞が何なのかあたりを開示してもらえれば、 多少はアドバイスをしてもらえそうな気がします。

(無題) 削除/引用 No.2553-4 - 2013/11/14 (木) 19:12:14 - 独り言 かなりざっくばらんな質問ですね。包丁をつかって料理をしたけど美味しくなかったので、美味しくなる方法を教えて下さいといきなり言われた感じです。何の料理かもわからないし、何の材料をつかったのかもわからないし、どのような味になったのかもわからないし。 １、酵素によりタンパク質の安定性や条件がそれぞれあるので、何の酵素かわからないとアドバイスができない。 ２、何の細胞か、もしくは組織からわからいと、どのような抽出方法がてきしているのかアドバイスできない。 ３、何の基質をつかっているのかわからないと、アドバイスできない。 などなど。

(無題) 削除/引用 No.2553-3 - 2013/11/14 (木) 17:24:01 - おお ポジこんは活性があると分かっているものをいいます。そのほかは蛋白(酵素)によって扱いがちがいますので、なんともいえません。

(無題) 削除/引用 No.2553-2 - 2013/11/14 (木) 17:21:03 - TS つっこみどころ満載の感じですが、指導教員の先生はいないのでしょうか。 たぶん先生に聞くのが一番です（そういう段階と思います）。

酵素活性 削除/引用 No.2553-1 - 2013/11/14 (木) 16:54:08 - ほん 常識的な事かもしれませんが教えてください 現在研究で酵素活性を測定しようかとおもっております。蛋白や酵素などまだ扱ったことがなく手さぐりでやってます。 蛋白の抽出ですが色々な方法で最後はSONIFIRで細胞を破壊して上清を回収して保存しました。 酵素活性で基質を用意して濃度を調節してNano　Drop2000という機械で測定しましたがうまく測定できません。基質の波長も決められた波長でやりましたがうまくでません。 原因として蛋白がうまく抽出ないか、基質の濃度など色々ありますがそれよりまずその機械で測定できるか確認するためにPosi Conみたいなやつがあればいいなとおもいますがどういうものかまったくわかりません。 わかりずらくてすみません。参考文献とかでも御存じの方がいれば教えていただけると幸いです。

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