Bio Technical フォーラム

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SDSPAGE of potassium ion containing samples トピック削除
No.2836-TOPIC - 2014/02/19 (水) 06:46:49 - おお
potassium ion はSDSと相性がわるくちんでんしてしまいます。なにかこれを解決する工夫とか方法とかご存じでしたら教えていただければさいわいです。

尿素とかでなんとかなるかな。。。
 
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No.2836-8 - 2014/02/20 (木) 13:22:46 - おお
ありがとうございました。それぐらいでも大丈夫なんですか。なら若干薄めればこんかいはいけるかな。。。

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No.2836-7 - 2014/02/20 (木) 13:19:22 - 独り言
100mMぐらいです。

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No.2836-6 - 2014/02/20 (木) 06:29:54 - おお
室温で沈殿するぐらいの量はいっていることもあるのですが、 独り言さんの系ではどれくらいのK+の濃度でしょうか?

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No.2836-5 - 2014/02/19 (水) 22:24:25 - 独り言
ウエスタンブロット用のサンプルであれば、4度だとpotassiumがprecipitatesしてしまうので、50度以上で1分ほど暖めて、室温に戻してから泳動してます。

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No.2836-4 - 2014/02/19 (水) 17:47:15 - 中年
すっかり忘れていましたが、同僚がStratacleanというレジンを使って希薄な溶液からタンパク質を回収していたのを思い出しました。私自身は当時はその必要が無かったので経験はありませんが、操作は簡単だし、その同僚のタンパク質はほとんどロス無く回収できているようでしたが、効率は目的とするタンパク質によるかもしれません。

Anal Biochem. 1997 Aug 1;250(2):257-60.
Concentration of dilute protein solutions prior to sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis.
Ziegler J, Vogt T, Miersch O, Strack D.
PMID: 9245449

(無題) 削除/引用
No.2836-3 - 2014/02/19 (水) 17:01:14 - mon
しかたなくTCA沈殿しています。
過剰量のSDSを加えて遠心して上清を使う、なんてダメかな。タンパクが共沈殿しなければ行けそう。

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No.2836-2 - 2014/02/19 (水) 12:52:42 - 中年
サンプルが濃いときは希釈して、薄いときは諦めてアセトン沈かエタ沈しています。他に良い方法があるなら私も知りたいです。

SDSPAGE of potassium ion containing samples 削除/引用
No.2836-1 - 2014/02/19 (水) 06:46:49 - おお
potassium ion はSDSと相性がわるくちんでんしてしまいます。なにかこれを解決する工夫とか方法とかご存じでしたら教えていただければさいわいです。

尿素とかでなんとかなるかな。。。

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