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(無題) 削除/引用 No.2899-6 - 2014/04/02 (水) 20:38:28 - ho いつも25V15分ですが、ほとんど抜けもなく移ります。 高分子量部分が少しゲルに残っている場合はありますが。 特定たんぱくの比較であれば、同じゲル、同じブロッティングバッファー 組成であれば問題ないと思います。あくまでその実験内でです。 複数サンプルを別のゲルで泳動する場合は全て均一にする必要があると思います。

(無題) 削除/引用 No.2899-5 - 2014/04/02 (水) 17:40:30 - speed star ムラがでないために条件検討が必要なら、特定のタンパク質の発現量比較の時に際どいと思ったのですが、通常とほぼ変わらないと考えて良いのですね。 良く扱うサンプルでPVDF重ねたりして試してみます。

(無題) 削除/引用 No.2899-4 - 2014/04/02 (水) 13:52:18 - ho 基本的にはそのままで大丈夫ですよ。 ただ、効率が悪い時にはメタノールを抜いたり等はします。 >>そのようなことが必要ならポジコンを置くにしてもタンパクの有無を議論するのに都合悪くないですか？ 仰ってる意味がよく分からないのですが、最も目的たんぱく質がよく移る条件を設定する 事に何か不都合はあるのですか？たんぱくの有無の議論という意味が分かりません。

(無題) 削除/引用 No.2899-3 - 2014/03/31 (月) 17:54:44 - speed star >SDSやメタノールは適宜濃度を変えますが。 通常のプロトコールだと一般的なマーカーの範囲では高分子が転写されないことや、低分子が膜を通過してなくなることはなく一定条件で転写してます。 SDSやメタノールをいじるのは一般的なのでしょうか？ そのようなことが必要ならポジコンを置くにしてもタンパクの有無を議論するのに都合悪くないですか？

(無題) 削除/引用 No.2899-2 - 2014/03/21 (金) 00:25:37 - ho 別に一般的なバッファーで25V15分で移ります。 そんなに遅いですか？ 小さいものから大きなものまでだいたい移る印象です。 SDSやメタノールは適宜濃度を変えますが。

タンパク質の高速ブロッティング 削除/引用 No.2899-1 - 2014/03/18 (火) 10:36:43 - speed star 各社から高速ブロッティング製品が出ていますが、ネット上でプロトコールが見つけられません。自作で良好な結果が得られる方法をご存知の方いませんか？

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