Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

安定発現細胞作成の際のベクターのプロモーター トピック削除
No.3027-TOPIC - 2014/05/12 (月) 19:31:45 - 新参者
はじめまして。

ひとつ教えてください。お願いします。

2種のタンパクを同時に発現する安定発現細胞(哺乳類細胞)を作成する際の発現ベクターなのですが、その際に別の2種類の発現ベクターを用いて作成する場合、両方のベクターが同じプロモーターを用いていてはいけないものなのでしょうか?

文献などをざっと読んでみる限りでは、別々のプロモーターを用いているものしか見当たらなかったのでこのような疑問を感じました。

同じではいけないものなのでしょうか?同じプロモーターだと、干渉のようなものがあるのでしょうか?
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



3件 ( 1 〜 3 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.3027-3 - 2014/05/13 (火) 07:42:08 - mon
同じplasmidに搭載されていると、大腸菌での欠失が生じやすい、プロモーター干渉(実質はエンハンサー(様)機能の干渉)が生じ発現量が予想より低下する可能性があるなど欠点はありますが、使えます。Insulatorで分断すればプロモーター干渉は避けられます。
別々のplasmidであればゲノムに組み込まれる位置も異なりますし問題無いですよ。私は選択マーカー(SV40プロモーター)のみ異なり、プロモーターは同一(CMV)のレンチウィルスベクターで3種の遺伝子を導入していますが、問題無いですよ。
どちらかというと、CMVプロモーターのサイレンシングの方が厄介です。

(無題) 削除/引用
No.3027-2 - 2014/05/12 (月) 21:03:14 - Harmonia
『「同じではダメ」を否定する』というわけではないですが、選択マーカー
を違うものにしたら、たまたまプロモーターが別だったとか?

安定発現細胞作成の際のベクターのプロモーター 削除/引用
No.3027-1 - 2014/05/12 (月) 19:31:45 - 新参者
はじめまして。

ひとつ教えてください。お願いします。

2種のタンパクを同時に発現する安定発現細胞(哺乳類細胞)を作成する際の発現ベクターなのですが、その際に別の2種類の発現ベクターを用いて作成する場合、両方のベクターが同じプロモーターを用いていてはいけないものなのでしょうか?

文献などをざっと読んでみる限りでは、別々のプロモーターを用いているものしか見当たらなかったのでこのような疑問を感じました。

同じではいけないものなのでしょうか?同じプロモーターだと、干渉のようなものがあるのでしょうか?

3件 ( 1 〜 3 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。