Bio Technical フォーラム

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酵素液分注の際のチップの滅菌について トピック削除
No.3062-TOPIC - 2014/05/23 (金) 11:06:57 - ジュニパー
閲覧ありがとうございます

現在酵母から酵素を抽出し食品に添加し凝固させる実験を行っています
基本的に使用する器具はすべてオートクレーブにて滅菌するようにしています
酵素抽出液を冷凍保存する際エッペンドルフチューブに分注するのですが、その際滅菌されていない、袋から詰め替えただけのチップを使用してしまいました

コンタミの可能性は高いとして、そのまま実験に使用した場合は結果に致命的な影響を及ぼすと思いますか?それとも破棄した方が良いでしょうか?
なぜか酵母の収量が低く、あまり酵素液を無駄にできない状態なので可能ならそのまま使用したいです・・・
 
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No.3062-5 - 2014/05/24 (土) 22:55:38 - 名無し
通常の実験では酵素抽出液を無菌的に扱うことはあまりないとおもうけど、食品に添加する際に問題になるなら、酵素抽出液の無菌操作に気をつかうよりも添加前に0.22μmの小型滅菌フィルターとかに通すほうがいいような気がするんだが。

実際、その作業に関わるそれ以外の器材で滅菌していないものがあれば、また一連の過程が無菌環境での操作でなければ、チップだけ気をつけても意味ないと思うし。
エッペンドルフチューブとかも滅菌してるのかな、また酵素の抽出に使う試薬や水とかはどうなのかな。

(無題) 削除/引用
No.3062-4 - 2014/05/23 (金) 12:44:08 - おお
実際何をみるのかとか具体的なことが示されていませんので、よくわかりません。

食品に添加するときの温度とかいろいろな要因があるとはおもいますが、コンタミすることを前提でかんがえるべきでしょう

(無題) 削除/引用
No.3062-3 - 2014/05/23 (金) 12:38:51 - fi
1ml程度であれば、0.22umのフィルター(直径4mm)で滅菌することもできます。
液量のロスと吸着によるロスは覚悟しないといけませんが。
数個であれば、サンプルをもらえるかもしれません。

(無題) 削除/引用
No.3062-2 - 2014/05/23 (金) 12:30:21 - ~
その酵素を添加した際に、どのような処理を行い、初発で菌がどのくらい混入していたら結果に影響するかを考えましょう。
温度が菌の増殖に適しているほど、また、インキュベートが長ければ長いほど、結果に与える影響は大きくなるでしょう。

そのあたりを考えられないということは、ジュニパー さんは独立した研究室を持っているのではなく、指導者の下で研究しているのですよね。
指導者に確認しましょう。

酵素液分注の際のチップの滅菌について 削除/引用
No.3062-1 - 2014/05/23 (金) 11:06:57 - ジュニパー
閲覧ありがとうございます

現在酵母から酵素を抽出し食品に添加し凝固させる実験を行っています
基本的に使用する器具はすべてオートクレーブにて滅菌するようにしています
酵素抽出液を冷凍保存する際エッペンドルフチューブに分注するのですが、その際滅菌されていない、袋から詰め替えただけのチップを使用してしまいました

コンタミの可能性は高いとして、そのまま実験に使用した場合は結果に致命的な影響を及ぼすと思いますか?それとも破棄した方が良いでしょうか?
なぜか酵母の収量が低く、あまり酵素液を無駄にできない状態なので可能ならそのまま使用したいです・・・

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