Bio Technical フォーラム

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細胞培養 希釈 トピック削除
No.3075-TOPIC - 2014/05/28 (水) 09:22:27 - さや
細胞培養初心者です。ある細胞を1/2づつ2枚、
また別なものは1/3づつ3枚にするように言われました。
出来上がり量はいずれも培地を含め18mlと指定されています。
遠心後の細胞は何mlで懸濁し、何mlづつ入れればよいのでしょうか。
よろしくお願いします。
 
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No.3075-5 - 2014/05/29 (木) 07:50:29 - Harmonia
> 遠心後の細胞は何mlで懸濁し、何mlづつ入れればよいのでしょうか。

なぜその疑問が出たのかを説明していただきたい。
ものすごく大事なポイントが隠れているかもです。

単純には2枚なら36 ml、3枚なら54 mlですよね?
そこをあえて質問した意図は?

(無題) 削除/引用
No.3075-4 - 2014/05/28 (水) 22:35:22 - おお
けんだくさせるものが培地でない場合、あまり多いと培地成分が希釈されたり、培地成分以外のものがまじるということがありますので、あまり多くは使えないでしょう。PBSなどであれば10倍以上の希釈になるようにしたいところです。10倍でもちょっと多いなという感覚です。

培地ならたとえばいきなり36mlいれて2つに分けるという手も取れます。

まあラボの流儀、実験目的などいろいろあると思いますので的を得たことをいっているかわかりません。

(無題) 削除/引用
No.3075-3 - 2014/05/28 (水) 11:36:14 - ~
私は秤量誤差や細胞懸濁液の不均一性を拾わないように、
ディッシュ1枚当たり1mL以上を分注するように指導しています。
ただ、もっと少ない量で分注している人もいます。

また、不明点が分注量だけのように書かれていますが、
遠心前の細胞回収法、培地のコンディショニングの要不要、遠心時のg・時間・温度、懸濁する溶媒、懸濁の程度などは大丈夫ですか?

一度、作業手順をノートに書いて、指導者や先輩に確認してもらいましょう。

(無題) 削除/引用
No.3075-2 - 2014/05/28 (水) 09:28:18 - h
状況によって異なるので、答えられる人はいませんよ。
上司に聞いて下さい。

細胞培養 希釈 削除/引用
No.3075-1 - 2014/05/28 (水) 09:22:27 - さや
細胞培養初心者です。ある細胞を1/2づつ2枚、
また別なものは1/3づつ3枚にするように言われました。
出来上がり量はいずれも培地を含め18mlと指定されています。
遠心後の細胞は何mlで懸濁し、何mlづつ入れればよいのでしょうか。
よろしくお願いします。

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