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マウス末梢血の赤血球のCD45 トピック削除
No.3220-TOPIC - 2014/07/16 (水) 19:00:04 - まなとん
一般的に赤血球と血小板はCD45が発現していないとされていますが、自分のマウスで末梢血を溶血したあと、Ter119で染色した場合Ter119(+)の集団は、ほとんどCD45の発現も陽性になるんです。これは特異的なことでしょうか?もう一つ、骨髄では、どの分画までCD45は発現しているんでしょうか。どなたか詳しい方教えていただければ幸いです。
 
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No.3220-4 - 2014/07/18 (金) 11:01:09 - まなとん
なるほど、そういうことがあるのですね。ありがとうございます。

(無題) 削除/引用
No.3220-3 - 2014/07/18 (金) 02:49:17 - L
TER119陽性の赤血球、赤芽球系の細胞は、ACKなどの溶血バッファー処理でかなり死んでしまいます。例えば、マウス骨髄や脾臓の細胞を溶血処理した後、FSCで生き残った赤血球を除いて解析すると、残っているTER119陽性細胞は、CD71陽性の赤芽球系前駆細胞が主体になります。この細胞分画がCD45を発現しているかどうか調べた事はないのですが、発現していても不思議はない(前駆細胞なので)とも思います。ただし、leukoerythroblastosisを起こす何らかの疾患マウスでない限り、赤芽球系前駆細胞はあまり末梢血には出てこないと思うので、ちょっと?です。

何となく、非特異染色(例えば、溶血後の赤血球の残骸が白血球に付着して、TER119/CD45陽性に見えている)を見ているような気がします。

(無題) 削除/引用
No.3220-2 - 2014/07/17 (木) 18:01:19 - loach
わざわざ溶血をした後に赤血球を解析している意味はわかりかねますが、
溶血をしなくてもTER119陽性細胞でCD45は染まるのでしょうか?
赤血球のFSCとSSCは溶血前と変わりありませんか?

経験的に、死んでゴミのようになった細胞には抗体が非特異にベタベタくっつく印象があります。
また、抗体の組み合わせが悪く一方の抗体に対してもう一方の抗体が結合してしまい、見かけ上ダブルポジティブになってしまった経験があります。

マウス末梢血の赤血球のCD45 削除/引用
No.3220-1 - 2014/07/16 (水) 19:00:04 - まなとん
一般的に赤血球と血小板はCD45が発現していないとされていますが、自分のマウスで末梢血を溶血したあと、Ter119で染色した場合Ter119(+)の集団は、ほとんどCD45の発現も陽性になるんです。これは特異的なことでしょうか?もう一つ、骨髄では、どの分画までCD45は発現しているんでしょうか。どなたか詳しい方教えていただければ幸いです。

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