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ゲルろ過カラム 気泡が発生 トピック削除
No.3232-TOPIC - 2014/07/23 (水) 12:45:05 - ken
ゲルろ過カラムを使用しております。カラム下の溶出口から時おり気泡が出てきます。最近頻度が高く困っています。原因は不明であり、特にカラムに明らかな気泡があるわけではありません。非常に細かな泡がカラムに入っているのではと推測しておりますが、解決方法が不明です。是非ともご教授お願いします。
 
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No.3232-5 - 2014/07/23 (水) 20:41:37 - 名無し
ゲル濾過で、オープンカラムに担体詰める時センセに、一応バッハー脱気しれ、言われたような記憶がある。昔のことであれなんだが。
4Cの寒い部屋からあったかい部屋に持ち出すとカラム内で気泡が生じることあるから、担体つめたカラムは一端4C入れたら出したらだめだよ、とかも言われた。カラムの温度変化は注意した方がいいとおもう。くっ付けてから何かで溶出する系のクロマトならば少々気泡入っててもまあいいのかもしれないとおもうけど、ゲル濾過の場合はやっぱ結果に影響するとおもう。

ある程度以上の大きさ(てか長さ)のオープンカラムの場合、担体をカラムにつめる時、通常リザーバーとかつかうもんなんだが、使ってるかな?使ってるなら別にいいんだが。
直にカラムの口にスラリーをザーッって流し込むとやっぱ空気入りやすい。また少しずつ何回にも分けていれると不均一的なカラムになりやすいとおもうので、もし使ってないならばリザーバー使った方がいい。

HPLC/FPLCのゲル濾過ならば流路のどっかにカラム内で気泡生じないようにデガッサーとかの機器もつけてるとおもうんだが、もしつけてないならつければ。

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No.3232-4 - 2014/07/23 (水) 13:03:29 - AP
カラム、あるいはバッファーの保存温度より使用時の温度が高いのに馴化せずに使用したとか(温度の上昇により溶存ガスが放出された)。

(無題) 削除/引用
No.3232-3 - 2014/07/23 (水) 12:55:45 - mon
manualとかに記載ありませんか?
原因は展開液の不十分な脱気でしょう(あるいは作り置きしておいたため空気が溶け込んだ)。
十分脱気したDDWまたは、それで調製した20%EtOHを逆向き(下から上)に流すと良いでしょう。
気泡の量にもよりますが、10 column vol.位かな?

(無題) 削除/引用
No.3232-2 - 2014/07/23 (水) 12:49:47 - おお
カラムはオープンカラムですかFPLCとかのカラムですか?

オープンだとカラムからポンプや自由落下で引くときに陰圧になりすぎて、バッファー中の空気が出てくることがあります。

ゲルろ過カラム 気泡が発生 削除/引用
No.3232-1 - 2014/07/23 (水) 12:45:05 - ken
ゲルろ過カラムを使用しております。カラム下の溶出口から時おり気泡が出てきます。最近頻度が高く困っています。原因は不明であり、特にカラムに明らかな気泡があるわけではありません。非常に細かな泡がカラムに入っているのではと推測しておりますが、解決方法が不明です。是非ともご教授お願いします。

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